《原理图》
细胞凋亡是指为维持有机体内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡。正常情况下,任何细胞在形成过程中发生的异常都会通过凋亡消除。例如,体内的癌细胞增长为肿瘤的过程会受细胞凋亡的引导而被抑制。然而,在抑癌基因p53出现问题时,凋亡就不会诱导发生,从而导致癌细胞的不断增长。
细胞凋亡可以通过细胞形态的变化或生物化学的变化来检测。目前常用的指标有caspase活性变化、DNA碎片、磷脂酰丝氨酸的外翻等。
Annexin V染色的细胞可以用于检测细胞凋亡早期的细胞膜变化。在细胞凋亡早期,膜磷脂酰丝氨酸由脂膜内侧翻向外侧。
Annexin V是一种Ca离子依赖性磷脂结合蛋白,可以与磷脂酰丝氨酸特异结合。用绿色荧光FITC标记的Annexin V通过流式细胞仪或荧光显微镜可以检测到细胞凋亡的发生。碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种核酸染料,PI只能透过凋亡晚期和死细胞的细胞膜,因此Annexin V和PI结合使用,可以区分凋亡早晚期的细胞及死细胞。