《原理图》
Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST®是通过测定细胞释放到培养基中的乳酸脱氢酶(LDH)活性进而测定细胞损害的试剂盒。LDH(乳酸脱氢酶)是存在于细胞质的一种酶,当细胞膜受到损伤时,LDH 会释放到培养基中。由于释放出的LDH 稳定,检测培养基中LDH 的量可以作为测定死细胞和受损细胞数量的指标。
本试剂盒可以测定受损细胞所释放出的LDH,其原理是LDH 催化乳酸生成丙酮酸和NADH,NADH 通过电子载体可将水溶性四唑盐WST®(无色)还原成甲臜产物(橙色),WST®甲臜产物的吸光度与LDH 的量呈正比,利用此原理可以测定死细胞和受损细胞的数量。
本试剂盒中试剂不会和活细胞反应,而且对细胞无损害,可以直接添加到含有细胞的培养基中检测(一步法)。也可以分离细胞后,加到培养基中检测(低损伤法,分离的细胞可以做其他实验)。本试剂盒采用稳定性高的WST®,配置后的溶液可以长时间保存,不需要现配现用,适用于高通量筛选。
《特点》
- 双重选择:有2种检测方法(一步法、低损伤法)
- 操作简单:不需要分离死细胞和活细胞,就可检测死细胞的LDH *一步法
- 仪器常用:采用常规酶标仪检测
- 稳定方便:Working Solution可冷藏保存6个月,不需要现配现用
- 双重验证:配合使用CCK-8可获得死细胞和活细胞的结果
《操作示意图》
加Working Solution 反应30 min 加Stop Solution 在490 nm测定吸光度
(在高对照孔中, 终止反应
在加Working Solution
前先加Lysis Buffer)
《适用范围》
1.细胞毒性检测
2.细胞保护、损伤
3.效靶细胞杀伤实验
(1)抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用(ADCC,Antibody-Dependent Cell-Mediated Cytotoxicity)
(2)嵌合抗原受体T细胞免疫疗法(CAR-T,Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy)
(3)T细胞受体疗法(TCR-T,T cell receptor)
(4)肿瘤浸润淋巴细胞疗法(TIL ,Tumor Infiltrating Lymphocyte)
(5)自体细胞免疫疗法]多种细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK,Cytokine-Induced Killer)
(6)NK自然杀伤细胞实验(NK,natural killer cell)
同时本公司还为广大从事以上研究的科研人员准备了部分的参考实验例(ADCC、CAR-T),欢迎随时联系我们索要资料,谢谢!