4',6-Diamidino-2-phenylindole

DAPI 试剂

产品简介：

DAPI是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料。和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。和EB(ethidium bromide)相比，对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。

CAS：28718-90-3

分子式：C₁₆H₁₅N₅·2HCl

分子量：350.25

储存条件：2-8℃ 避光储存

外观（性状）：黄色粉末

单位：支

纯度：≥95%

有效期：两年

应用：DAPI染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。 DAPI的最大激发波长为340nm，最大发射波长为488nm；DAPI和双链DNA结合后，最大激发波长为364nm，最大发射波长为454nm。

使用方法：可溶解于水、DMSO和DMF。用于细胞核染色时，推荐的DAPI工作浓度为0.5-10μg/ml。建议分装保存，避免反复冻融。

1.配制工作液：用双蒸水或PBS稀释母液，配制成所需要的工作的浓度（0.5-10μg/ml）。

2.固定的细胞或组织染色：

对于固定的细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。DAPI染色通常在其他染色的最后进行。如果不需要进行其它染色，则直接进行DAPI 染色。

a.      对于贴壁细胞或组织切片：加入适量DAPI染色液，覆盖住样品即可。

对于悬浮细胞：至少加入待测染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3-5分钟。

b.    吸除DAPI染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。

c.    直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长360nm，发射波长460nm。

3. 活细胞或组织染色：

a.   细胞培养物中加入适量DAPI染色液，约1/10细胞培养基体积，必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液，对于96孔板一个孔需加入100μl染色液。

b.   在 37℃培养细胞 10～20 分钟。

c.   用 PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。

d.   直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长360nm，发射波长460nm

注意事项：

1.      DAPI对人体有一定刺激性，请注意适当防护。

2.      荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。

3.      为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。

4.      本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。

5.      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。