Product Brief

Instructions

工作原理

SABC是专为免疫化学而设计的，用以显示组织或细胞中的抗原分布。SABC-FITC 代表了传统的免疫荧光方法。荧光具有简便快速,不需显色既可直接观察的优点。但染色不能保存，敏感性较低是其缺点。将链霉亲和素—生物素引入荧光系统，能明显提高敏感性及降低背景。FITC 在490-495nm 激化，在520-530nm 发射荧光，呈黄绿色。

使用说明

石蜡切片染色程序:
1. 载玻片防脱片剂处理:可选择APES 或Poly-Lysine。捞片后置烤箱58-60 ℃30-60 分以使切片紧密粘附。
2. 切片脱蜡至水。
3. 必要时根据抗原情况对切片进行微波修复抗原或酶消化处理。蒸馏水洗2 分钟×3 次。
4. 滴加0.01M PBS 1：10 稀释的正常血清封闭液,室温20 分钟。甩去多余液体,不洗。
5. 滴加0.01M PBS 适当稀释的一抗，20-37℃ 1~2 小时或4℃过夜。0.01M PBS 洗2 分钟×3 次。
6. 滴加0.01M PBS 1：100 稀释的和一抗相对应的生物素化二抗,20-37℃ 30 分钟。0.01M PBS洗2 分钟×3 次。
7. 滴加0.01M PBS 1：100 稀释的SABC- FITC，20-37℃ 30 分钟。0.01M PBS 洗5 分钟×4次。
8. 水溶性封片剂封片。荧光显微镜观察。
血涂片，细胞和冰冻切片染色程序：
1.载玻片经防脱片剂处理（Poly-L-Lysine）。抗凝血经分层离心后涂片；培养细胞也可涂片或贴片生长；冰冻切片室温风扇吹干。
2.固定方案首选4%多聚甲醛或10%福尔马林固定60-90 分钟。
3.必要时根据抗原情况对切片进行微波修复抗原或酶消化处理。蒸馏水洗2 分钟×3 次。其余步骤和石蜡切片4-8 步相同