Product Brief

Instructions

工作原理

SABC是专为免疫化学而设计的，用以显示组织或细胞中的抗原分布。DyLight是一种近年来被广泛应用的新型荧光染料，由于具有很好的光谱宽度、更强的荧光强度，更高的光学耐受性（抗淬灭性）和特异性，对pH不敏感、分子较小而渗透性更好的优势，标记的抗体比Cy2和FITC标记的更亮，但背景更低；DyLight 488-SABC，将链霉亲和素—生物素引入荧光系统，能进一步提高敏感性及降低背景。DyLight 488最大吸收峰 493nm；最大发射峰 518nm。呈黄绿色。

使用说明

石蜡切片染色程序:
1. 载玻片防脱片剂处理：可选择APES或Poly-Lysine。捞片后置烤箱58-60℃30-60分以使切片紧密粘附。
2. 切片脱蜡至水。
3. 必要时根据抗原情况对切片进行微波修复抗原或酶消化处理。蒸馏水洗2分钟×3次。
4. 滴加0.01M PBS 1：10稀释的正常血清封闭液，室温20分钟。甩去多余液体，不洗。
5. 滴加0.01M PBS适当稀释的一抗，20-37℃ 1~2小时或4℃过夜。0.01M PBS 洗2分钟×3次。
6. 滴加0.01M PBS 1：100稀释的和一抗相对应的生物素化二抗，20-37℃ 30分钟。0.01M PBS洗2分钟×3次。
7. 滴加0.01M PBS 1：200-800稀释的DyLight 488-SABC，20-37℃ 30分钟。0.01M PBS洗5分钟×4次。
8. 水溶性封片剂封片。荧光显微镜观察。

血涂片，细胞和冰冻切片染色程序：
1. 载玻片经防脱片剂处理（Poly-L-Lysine）。抗凝血经分层离心后涂片；培养细胞也可涂片或贴片生长；冰冻切片室温风扇吹干。
2. 固定方案首选4%多聚甲醛或10%福尔马林固定60-90分钟。
3. 必要时根据抗原情况对切片进行微波修复抗原或酶消化处理。蒸馏水洗2分钟×3次。
其余步骤和石蜡切片4-8步相同。