2×Taq plus Master Mix 含染料
产品编号 | 产品名称 | 规格 |
BL547A | 2×Taq plus Master Mix 含染料 | 1 ml |
BL547B | 2×Taq plus Master Mix 含染料 | 5 ml |
BL547C | 2×Taq plus Master Mix 含染料 | 25 ml |
BL547D | 2×Taq plus Master Mix 含染料 | 100 ml |
注:以50μl PCR反应体系为例,1ml可40次PCR反应,5ml可做200次PCR反应,25ml可1000次PCR反应,100ml可做4000次PCR反应。
产品简介:
本制品是将PCR反应所需的Taq酶、dNTPs、MgCl2以及反应缓冲液预先配制成2倍浓度的混合物。2×Taq plus Master Mix专为常规PCR扩增反应优化,扩增长度可达8kb,能对4kb及其以下长度的片段进行高效地扩增。使用时只需再加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应,大大地简化了操作过程,减少了PCR操作过程中的污染。提供普通型/快速上样型两种形式供您选择。经测试,染料的加入不影响PCR反应,在PCR反应完成后可直接电泳,节省时间。使用本试剂扩增得到的PCR产物3′端有一突出"A"碱基,可直接克隆于T载体中。
产品特点 :
高效:以λDNA为模板,扩增长度可达8kb,能高效扩增≤4kb片段。
灵敏:可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段。
稳定:反复冻融几十次,4℃放置30天,室温放置一周后,扩增性能不受影响。
快捷:PCR反应所必需试剂集于一管,数分钟即可完成反应体系配制。
便利:PCR反应后可直接电泳。
质量保证:
经检测无外源核酸酶残留,qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。
使用说明:
1、冰浴中彻底融化2×Master Mix,混匀后离心快甩将溶液收集到管底。
2、按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系:
50μl反应体系 | 终浓度 | |
2×Master Mix | 25μl | 1× |
上游引物 10μM | 1-5μl | 0.2-1.0 μM |
下游引物 10μM | 1-5μl | 0.2-1.0 μM |
模板 | × μl | 1-50(质粒) 10ng-1μg(基因组) |
水 | 补至50μl |
3、快甩离心将反应液收集到管底。
4、PCR仪如果没有热盖加热的话,补加25μl矿物油。
5、PCR仪上执行以下程序:
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
初始变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 30 sec | 25-40* |
退火 | Tm-5℃* | 30 sec | |
延伸 | 72℃ | 1 min/kb | |
最后延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。
注意事项:
1、 需要溶解完全后使用,防止离子浓度不均匀。
2、 菌液 PCR 时预变性间≥5min,更有利于破壁。
3、 应根据实验目的选择合适循环数,会造成扩增量不足;循环数过多,扩增量增加,但突变率也会增加,并造成非特异性扩。
4、 根据引物 Tm 值设置合适退火温度 ,退火温度过低,会造成非特异性扩增;过高可能扩增不到。
5、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件:
-20℃保存一年有效;4℃稳定贮存3个月。经常使用时,一旦融化后请4℃贮存,尽量避免反复冻融。
温馨提示:因厂家更改产品包装、产地或者更换随机附件等没有任何提前通知,且每位咨询者购买情况、提问时间等不同,为此以下回复仅对提问者3天内有效,其他网友仅供参考!若由此给您带来不便请多多谅解,谢谢!
服务热线
0771-3293894