您好！欢迎来到炼石商城请登录注册兼职小伙伴

我的购物车

Qiagen 凯杰 Biosharp Omega

客服热线 0771-3293894

首页感受态细胞上海源叶>

图片仅供参考，请以实物为准

R5421 感受态细胞 0% 100ul*50

市场价：: 1020.00

促销价：: ¥1020.00

货号：S32921-100ul*50

品牌：上海源叶

配送至：

北京朝阳

支付：账期货到付款

数量：

EA (预计4-5工作日到货)

工作时间

周一至周五：9:00-18:00

咨询电话

0771-3293894

在线咨询

: 客服郭恒蔡玉坤曾宪飞技术咨询

浏览了该商品的用户最终购买

RNeasy Mini Kit (50) 50次

3720.00

Plasmid Mini Kit I(200) 200...

576.00

10ul吸头，透明，袋装，可灭菌...

85.80

浏览了该商品的用户还浏览了

QIAfilter Plasmid Maxi Kit (...

3000.00

QIAamp DNA Blood Midi Kit (2...

2680.00

QIAamp UCP Pathogen Mini Kit...

4112.00

商品介绍
商品咨询

注明：此产品需要干冰运输，需要额外加350元干冰运输费用

英文名：
R5421 Chemically Competent Cell

别名：

介绍：基因型MATα ura3-52 leu2 trk1Δ his3Δ200 his4-15 trk2Δ1::pCK64简要说明 R5421酿酒酵母菌株为K+/钾离子缺陷型菌株，在文献中也称为CY162，MATα型，多用于K+/钾离子转运蛋白的鉴定试验中，也可用于K+/钾离子通道或钠钾离子泵的鉴定试验。Transformation marker为：ura3，leu2，该菌株可以在含有100mM KCl的培养基中国正常生长，在含有5-10mM KCl的培养基中生长缓慢，当培养基中KCl浓度低于0.5mM，R5421（CY162）细胞停止生长。R5421感受态细胞经特殊工艺制作，-80℃可保存三个月，pGADT7质粒检测转化效率>103 cfu/μg DNA。操作说明1. Carrier DNA 在每次使用前要通过加热处理使其变性为单链状态，步骤如下：Carrier DNA 放95℃水浴或金属浴3 min，快速插入冰中，静置3 min，再次放95℃水浴或金属浴3 min，快速插入冰中，静置3 min以上。2. 取100 µl冰上融化的R5421感受态细胞，依次加入预冷的目的质粒0.5-3 µg，Carrier DNA10 µl，PEG/LiAc 500 µl并吸打几次混匀，30℃水浴30 min (15 min时翻转6-8次混匀)。3. 将管放42℃水浴15 min (7.5 min时翻转6-8次混匀)。4. 5000 rpm离心 40 s弃上清，ddH2O 400 µl 重悬，离心 30s弃上清。5. ddH2O 50 µl重悬，涂板，29℃培养48-96 h。注意事项1. 感受态细胞最好在冰上融化。2. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。3. 同时转化2-3种质粒时可增加质粒的用量。4. R5421酵母菌株对高温敏感，最适生长温度为27-30℃；高于31℃，生长速度和转化效率呈指数下降。5. 菌落变粉不是污染，是酵母细胞生长中一个常见现象。当细胞在平板培养几天后，平板上的Adenine被酵母消耗完毕，酵母试图通过自身代谢途径合成Adenine以供利用，然而，有些菌株的ADE2基因被破坏，Adenine合成途径受阻；又由于其ADE4,5,6,7,8基因均正常，所以造成中间产物P-ribosylamino imidazole (AIR) 在细胞中积累而使菌落变为粉红色。6. 酵母在缺陷培养基中生长速度比YPDA培养基慢，培养基中缺陷成分越多，生长越慢，以转化涂板为例：涂YPDA平板29℃，48 h培养可见直径1 mm克隆；涂SD单缺平板29℃，48-60 h培养可见直径1 mm克隆，涂SD双缺平板29℃，60-80 h培养可见直径1 mm克隆，涂SD三缺或四缺平板平板29℃，80-90h培养可见直径1 mm克隆。