您好！欢迎来到炼石商城请登录注册兼职小伙伴

我的购物车

Qiagen 凯杰 Biosharp Omega

客服热线 0771-3293894

首页感受态细胞上海源叶>

图片仅供参考，请以实物为准

EGY48 感受态细胞 0% 100ul*10

市场价：: 240.00

促销价：: ¥240.00

货号：S32916-100ul*10

品牌：上海源叶

配送至：

北京朝阳

支付：账期货到付款

数量：

EA (预计4-5工作日到货)

工作时间

周一至周五：9:00-18:00

咨询电话

0771-3293894

在线咨询

: 客服郭恒蔡玉坤曾宪飞技术咨询

浏览了该商品的用户最终购买

RNeasy Mini Kit (50) 50次

3720.00

Plasmid Mini Kit I(200) 200...

576.00

10ul吸头，透明，袋装，可灭菌...

85.80

浏览了该商品的用户还浏览了

QIAfilter Plasmid Maxi Kit (...

3000.00

QIAamp DNA Blood Midi Kit (2...

2680.00

QIAamp UCP Pathogen Mini Kit...

4112.00

商品介绍
商品咨询

注明：此产品需要干冰运输，需要额外加350元干冰运输费用

英文名：
EGY48 Chemically Competent Cell

别名：

提示：详情请下载说明书。

介绍：基因型MATα, ura3, his3, trp1, LexAop (x6)-LEU2简要说明EGY48菌株是Clontech公司开发的LexA 系统酵母双杂实验用菌株，MATa型，可直接转化质粒进行蛋白互作验证或筛库试验；Transformation marker为: his3, trp1, ura3，报告基因为：LEU2；报告基因UAS（上游激活序列）来源于LexA op(x6)，只有当Bait和Prey互作时才能启动LEU2表达。EGY48-LexA酵母双杂系统系统需要三种质粒配套使用：pLexA、pB42AD、p8op-LacZ。质粒pLexA的筛选标志为HIS3，用于表达DNA-BD(来自原核的202个氨基酸残基组成的LexA蛋白)与目标蛋白(Bait)的融合蛋白；质粒pB42AD的筛选标志为TRP1，用于表达AD(来自疱疹病毒的88个氨基酸残基组成的B42AD蛋白)与目标蛋白（Prey）的融合蛋白；报告质粒p8op-LacZ的筛选标志为URA3，报告基因为LacZ，报告基因UAS来源于LexA op(x8) ，只有当Bait和Prey互作时才能启动LacZ表达。High5TM系列Y2HGold感受态细胞经特殊工艺制作，-80℃可保存三个月，经PGBKT7质粒检测转化效率>104cfu/μg DNA 。操作说明1.取1管感受态细胞置冰上融化，6 000 rpm离心1min，去掉上清。2.加入320 μl LiTE/PEG溶液，重悬细胞，然后加入10μl Carrier DNA(95-100 度5min 快速冰浴，重复一次)，预冷目的质粒2-5ug,体积不多于20ul。3.充分混匀，于30度250 rpm转速下培养30 min。4.42度热激2.5min。5.6000 rpm离心1min，去掉上清。6.加入1 ml TE溶液，温和重悬细胞。7.6000 rpm离心1min，去掉上清。8.加入100 μl TE溶液，重悬细胞，将细胞涂布于相应的营养缺陷型固体合成培养基。9.30度倒置培养48-96h，直至形成大小合适的酵母菌落。Preparation of Media：YPDA （1L）:Tryptone 20gyeast extract 10g 0.2% adenine 15ml补水到 950ml，用盐酸调PH到 6.5Agar 20g (for plates only)121度，15分钟高压灭菌，待培养基温度降到55度时，加入已过滤的40% 葡萄糖 50 ml0.2% adenine(1L)Adenine 2g补水到1L，溶解后高压灭菌或0.22um滤膜过滤除菌注意事项1.感受态细胞最好在冰上融化。2.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。3.同时转化2-3种质粒时可增加质粒的用量。4.EGY48酵母菌株对高温敏感，最适生长温度为27-30℃；高于31℃，生长速度和转化效率呈指数下降。5.酵母在缺陷培养基中生长速度比YPDA培养基慢，培养基中缺陷成分越多，生长越慢，以转化涂板为例：涂YPDA平板29℃，48h培养可见直径1mm克隆；涂SD单缺平板29℃，48-60h培养可见直径1mm克隆，涂SD双缺平板29℃，60-80h培养可见直径1mm克隆，涂SD三缺或四缺平板平板29℃，80-90h培养可见直径1mm克隆。