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ER2566 感受态细胞 0% 100ul*50

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货号：S32875-100ul*50

品牌：上海源叶

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英文名：
ER2566 Chemically Competent Cell

别名：

提示：详情请下载说明书。

介绍：基因型F- λ- fhuA2[lon] ompT lacZ::T7gene1 gal sulA11Δ(mcrC-mrr)114::IS10R(mcr-73::miniTn10-TetS)2 R(zgb-210::Tn10)(TetS) endA1 [dcm]简要说明ER2566菌株是NEB公司开发的具有超高转化效率的蛋白表达原核菌株，来源于BL21。Lac启动子启动下游T7RNA聚合酶的表达，可用于T7启动子表达载体(如pET系列)的高水平蛋白表达。fhuA2赋予ER2566菌株对噬菌体T1的抗性。同时ER2566为lon 和 ompT蛋白酶缺陷菌株。Lon蛋白酶和膜外蛋白酶OMPT的缺失能够有效抑制表达的异源蛋白在大肠杆菌体内的降解，Δ(mcrC-mrr)114，mcr-73突变的存在使ER2566菌株无法对外源DNA进行标记、限制，提高了外源甲基化DNA的转化效率。High5TM系列ER2566感受态细胞由特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率达109 cfu/μg DNA。操作说明1.取100μl冰上融化的ER2566感受态细胞，加入目的质粒并轻轻混匀，冰上静置25分钟。2.42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB)，混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。4.5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。注意事项1. 感受态细胞最好在冰上融化。2.混入质粒时应轻柔操作。3.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。4.诱导时，IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。5.为获得需要量的蛋白，最佳诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化。