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货号：S32857-100ul*10

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介绍：基因型F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm rne131 (DE3)简要说明High5TM系列BL21 Star(DE3)感受态细胞来源于BL21(DE3)菌株，含有rne131基因突变体，rne131突变基因能够增强菌株细胞内mRNA的稳定性，从而提高蛋白表达能力。主要适用于T7启动子表达载体(如pET系列)的高水平蛋白表达。High5TM系列BL21 Star(DE3)感受态细胞由特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率达108cfu/μg。操作说明1.取100μl冰上融化的BL21 Star(DE3)感受态细胞，加入目的质粒并轻轻混匀，冰上静置25分钟。2.42℃水浴热激90秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB)，混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。4.5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。注意事项1.感受态细胞最好在冰上融化。插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。2.混入质粒时应轻柔操作。3.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。4.诱导时，IPTG浓度可选（0.1-2mM均可）。5.为获得需要量的蛋白，最佳诱导时间、温度以及IPTG浓度需实验者优化。