Bradford Protein Assay Kit 

Bradford蛋白浓度测定试剂盒

产品简介：

本公司生产的Bradford蛋白浓度测定试剂盒是根据目前广泛应用的蛋白浓度检测方法之一Bradford法研制而成。其操作简单，灵敏度高，检测速度极快。可检测浓度下限达25ug/ml的蛋白样品，最小检测蛋白量达到0.5ug，待测样品体积为1-20ul。

本产品主要成分为考马斯亮蓝G250。

产品组分：

使用方法:

1、 取1ml蛋白标准配置液加入到25mgBSA的蛋白标准管中，完全溶解蛋白标准品，即为25mg/ml的蛋白标准溶液。配制成的蛋白标准溶液可-20℃长期保存。

2、 取适量25mg/ml蛋白标准溶液，稀释至终浓度为0.5mg/ml。标准品最好与蛋白样品用同样的溶液稀释。但为了简便起见，通常使用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。

3、 做标准曲线。将标准品按0，1，2，4，8，12，16，20ul加到96孔板中，不足20ul的加标准品稀释液补足到20ul。

4、 将待测的蛋白样品稀释至合适浓度，加到96孔板中，使待测样品总体积也为20ul。

5、 每孔加入考马斯亮蓝G250溶液200ul，充分混匀（可将酶标板放在振荡器上振荡30s），室温放置3-5min后，以标准曲线0号做参比，在 595nm波长下比色测定，记录各孔吸光度值。以标准品蛋白含量（ug）为横坐标，吸光值为纵坐标，绘出标准曲线。

6、 如用分光光度计测定，请在第三步的时候将标准品体积改为1ml，浓度梯度用生理盐水稀释为0，1，2，5，10，15，30ug/ml。或根据样品调整浓度梯度。

7、将样品稀释至合适浓度，加到小试管中，使待测样品总体积也为1ml。

8、 每只试管加考马斯亮蓝G250溶液3ml，充分混匀，室温放置3-5min后，以标准曲线0号做参比，在 595nm波长下比色测定，记录各孔吸光度值。

注意事项：

1、 考马斯亮蓝G250溶液使用前请颠倒3-5次，混匀。

2、 蛋白标准请在全部溶解后先混匀，再稀释成一系列不同浓度的蛋白标准。

3、 将考马斯亮蓝G250溶液回复到室温再使用，有利于提高检测的灵敏。

4、 Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中β-巯基乙醇的浓度可高达1M，二硫苏糖醇的浓度可高达5mM。但受略高浓度的去垢剂影响。需确保SDS低于0.01%，Triton X-100低于0.05%，Tween 20,60,80低于0.015%。含去垢剂的样品推荐使用本公司生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒（BL521A）。染色时间不能太长，否则活细胞会因染料积累而染成颜色，使检测结果偏低。

5、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件：

考马斯亮蓝G250溶液室温保存，配置好的蛋白标准液-20℃冻存。效期一年。