识别位点
Endo H 和 Endo Hf 仅切割高甘露糖型结构(high mannose structures)(n = 2-150,x =
(Man)1-2,y = H)和杂合型结构(hybrid structures)(n = 2,x 和/或 y = AcNeu-Gal-GlcNAc)。
特性
概述
糖苷内切酶 H f 是糖苷内切酶 H 和麦芽糖结合蛋白组成的融合重组蛋白,具有与糖苷内切酶 H 相同的活性。
来源
糖苷内切酶 Hf 克隆自褶皱链霉菌(Streptomyces plicatus)并在 E. coli 中高度表达。
反应条件
将糖蛋白在 1X 糖蛋白变性缓冲液(含 0.5% SDS,40 mM DTT)中 100℃ 煮沸 10 分钟使其变性,再在
1X GlycoBuffer 3 反应缓冲液中于 37℃ 温育。热失活:65℃ 10 分钟。
随酶提供的试剂
10X 糖蛋白变性缓冲液
10X GlycoBuffer 3 反应缓冲液
分子量
Endo H f :70,000 daltons。
质量保证
单位定义
1 单位指 10 μl 的反应体系中,37℃ 条件下,1 小时从 10 μg 变性 RNase B 中除去超过 95%的碳水化合物所需要的酶量(10 NEB units = 1 IUBmilliunit)。
浓度
Endo H f 浓度:1,000,000 units/ml。
注意事项
酶活性不受 SDS 影响。
要使天然糖蛋白去糖基化,可能需要增加酶量并延长温育时间。
参考文献
有关该产品特性和应用的相关文献请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。