●质粒DNA抽提
回收的基因组DNA可以直接用于PCR等酶反应中。
本试剂盒与磁珠分离台架一起使用,可以从全血直接分离DNA,所以无需进行白血球的分离步骤,非常方便。
本试剂盒是用来从大肠杆菌中抽提高纯度质粒DNA的试剂盒。抽提的质粒DNA可直接用于测序、各种酶反应及转化反应中。
本试剂盒利用磁硅珠能吸附匀浆溶液中质粒DNA的原理来回收质粒DNA,无需借助苯酚等有害试剂来进行除蛋白操作和乙醇沉淀操作。而且,能将使用高速离心机进行的离心操作次数减到最少 (使用自动核酸抽提装置「MFX® 系列」时,无需离心操作)。
本试剂盒,可与磁珠分离专用台架一起使用。
●惊人的低成本
作为手动试剂盒,每处理一个样品的成本非常低。
●简便・短时间
其基本原理是利用磁硅珠对质粒DNA的吸附性,能简便地在短时间内抽提出质粒DNA。
●安全
不必使用苯酚/氯仿处理。
●可制备高纯度的质粒DNA
使用本试剂盒抽提的质粒DNA,几乎不含基因组DNA、RNA和蛋白质等杂质,可用于各种用途。
1. 用限制酶处理抽提后的质粒
对含pUC18的JM109转化体的过夜培养液1.2ml,使用本试剂盒和其他公司的试剂盒抽提质粒。结果显示,用本试剂盒抽提出的质粒中几乎不含有蛋白质和基因组DNA、RNA,能得到与其他公司的试剂盒同等甚至以上的得率。将得到的质粒的一部分进一步用限制酶进行酶切,结果与其他公司的试剂盒抽提得到的质粒一样可被完全酶解。 由此可见,通过使用本试剂盒,可从大肠杆菌等细菌中抽提出高纯度的质粒。 | |
将0.5μg本试剂盒抽提出的pUC18,用ABI PRISM 310 Genetic Analyzer进行测序。测序引物采用M13 Primer P8,试剂盒采用dRhodamine Terminator Cycle Sequencing FS Ready Reaction Kit(PE Applied Biosystems)。 结果显示,用本试剂盒抽提出的质粒的纯度完全符合自动测序仪的要求。
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1)B. Vogelstein and D. Gillespie, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 76:615-619(1979)
2)R. Boom et al., J. Clin. Microbiol., 28: 495-503(1990)
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