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●从培养细胞、组织、酵母等中抽提Total RNA
本试剂盒是用来从培养细胞和组织等生物样品中抽提高纯度Total RNA。回收的Total RNA主要用于RT-PCR等反应。
本试剂盒是利用磁性硅珠能吸附裂解溶液中的Total RNA的原理来回收Total RNA，无需使用原来的AGPC法中必需的苯酚等有害试剂去除蛋白质的操作和乙醇沉淀操作及高速离心分离操作。
本试剂盒可使用磁珠分离专用台架。
●适用于各种样品
能够从培养细胞、组织、酵母等中高效率地抽提Total RNA。Total RNA中主要包含rRNA和mRNA。
●简便・短时间
其基本原理是利用磁硅珠对Total RNA的吸附性，能简便地在短时间内抽提Total RNA。
●可进行高纯度Total RNA的抽提
1.得率与纯度的探讨
以人细胞株HL60的2×106细胞为样品，分别使用本试剂盒与用一般的RNA抽提法AGPC法进行Total RNA的抽提。结果显示，使用本试剂盒抽提时的得率与使用苯酚的AGPC法的得率大致相同，根据电泳模式及O.D.比值可知，能够抽提到几乎不含有蛋白质和DNA等杂质的高纯度RNA。
2.抽提RNA的RT-PCR示例
从2×106 个人的HeLa细胞中抽提的Total RNA中取1μg，以Transferrin receptor mRNA为目的片段(2,115bp)进行RT-PCR。结果显示，只有在进行了逆转录反应时才可以看到扩增，可以确认即使表达量较低的Transferrin receptor基因的表达也可以被检测到。
使用本试剂盒从大鼠各组织中抽提Total RNA。抽提时，将50〜100mg的组织用液氮冷冻后，用铁锤捣碎，再加入冰浴过的溶解・吸附液(含2−ME)750〜900μl，用Pestle充分匀浆，回收上清进行抽提。结果显示，使用本试剂盒即可从组织的匀浆上清中抽提高质量的RNA。
1)B. Vogelstein and D. Gillespie, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 76:615-619(1979)
2)R. Boom et al., J. Clin. Microbiol., 28: 495-503(1990)
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