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1链cDNA的合成
RNaseH活性在cDNA合成中，会分解作为模板/引物的DNA-RNA杂交体中的RNA，导致反
应效率下降。而本酶可降低该RNaseH活性。ReverTra Ace®通过在M-MLV(Moloney Murine Leukemia Virus) RTase基因的RNaseH活性结构域导入点突变，降低了该活性。
另外，RNA的高级结构会阻碍RTase反应的进行，使得cDNA合成困难。本酶通过在DNA合成结构域导入点突变，提高了反应效率及高温反应性能，所以可在高温下进行反应。因此，可通过提高反应温度来缓和模板RNA的高级结构，可促进RTase对cDNA的合成反应。
另外，本酶比原有的deletion型M-MLV RTase RNaseH−相比，高出其约4倍的活性，可高效率地进行cDNA合成。
●提高了延伸性
去除了M-MLV RTase的RNaseH活性，延伸性有了明显的提高。
●提高了反应效率・高温反应性
通过在M-MLV RTase的DNA合成区域中导入点突变及改良反应组分，提高了高温反应性和反应效率。
●最适合于RT-PCR
可在各种条件下进行逆转录反应，特别适用于RT-PCR。
1. 42〜60℃时的cDNA合成反应
以带有poly(rA) Tail，长度分别为9.49、7.46、4.40、2.37、1.35kb的RNA 0.4μg为模板，以oligo(dT)20 25pmoles为引物，在42〜60℃的反应条件下，用本酶100U，进行30min.的cDNA合成反应。
结果显示，用ReverTra Ace，在42℃及50℃时生成了9.49kb、55℃生成了4.4kb、60℃生成了2.37kb的cDNA合成产物。
2. cDNA合成效率的比较
以在in vitro条件下合成的G3PDH的RNA 102〜105copies为模板，使用G3PDH的下游引物，42℃、20min.进行cDNA合成反应后，加入G3PDH上游引物，用rTaq DNA Polymerase(Code No.TAP-201)进行PCR反应。
结果可见，用ReverTra Ace，即便是以102copies的RNA为模板合成的cDNA为模板，也可确认到扩增产物。
3. 14kb的cDNA合成反应
以Human骨骼肌poly(A) RNA为模板，使用dystrophin mRNA的3'端的特异性cDNA合成用引物，42℃、30min.进行cDNA合成反应后，使用mRNA的5'端特异性PCR引物对（位于cDNA合成引物上游14kb处），用KOD Dash(Code No.LDP-101) 进行PCR，判断有无延伸。
结果可见，使用ReverTra Ace，可合成14kb以上的cDNA。
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