●使用Taq DNA polymerase的热启动PCR
抗Taq DNA polymerase抑制了常温下Taq DNA polymerase的活性,从而抑制了非特异性的产生。
抗体在最初的PCR步骤中失活,对PCR反应没有影响。
该抗体在70℃以上时可迅速失活,所以与用化学修饰来抑制酶活的热启动法不同,不需要较长的变性步骤,在通常第一循环中的变性步骤下即可完全失活。
●确保抑制Polymerase活性
抑制PCR反应前常温下Polymerase活性45℃时可达95%以上。
●简便
PCR反应前仅需与Taq DNA polymerase混合即可。混合后的状态也可以保存,-20℃条件下可确保6个月稳定。
以人基因组DNA为模板的PCR例
使用A公司的Long PCR酶,以β-globin(3.6kb)为目的片段,进行PCR,验证了anti-Taq high的有效性。
结果显示,只有A公司的酶不能扩增,而使用anti-Taq-high进行热启动PCR则可以得到清晰的扩增条带。
另外,使用本产品,比B公司的Taq抗体可获得更好的结果。由此可见,本品的PCR特异性和灵敏度都得到了有效地提高。
1)R. T. D'Aquila, et al., Nucl. Acids. Res., 19: 3749(1991)
2)Q. Chou, et al., Nucl. Acids. Res., 20: 1717(1992)
3)D. E. Kellogg, et al., BioTechniqus, 16: 1134(1994)
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