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RT-PCR
| 使用高效率逆转录酶ReverTra Ace® 及高保真性PCR酶KOD -Plus-的高保真・高效率RT-PCR试剂盒。KOD -Plus- 的保真性是Taq DNA polymerase扩增时的约80倍，最适用于克隆。 | |
●使用高效率逆转录酶:ReverTra Ace®
使用通过基因工程改造的突变型M-MLV RTase 「ReverTra Ace®」，可合成14kb以上的cDNA。
●使用高保真性PCR酶:KOD -Plus-
使用高保真性PCR酶「KOD -Plus-」。本试剂盒在RT-PCR过程中，发生突变克隆的概率非常低：1kb目的片段约为3%，故适用于克隆。
●可对各种长度的目的片段进行扩增
通过对PCR缓冲液进行优化，对难扩增的目的片段也可以实现有效的扩增。
1. RT-PCR扩增性能的比较(目的片段长度的比较)
以HeLa细胞来源的total RNA为模板，使用各公司高保真性RT-PCR试剂盒进行扩增性能的比较。
结果显示，与其他公司的试剂盒相比，本试剂盒得到了更好的结果。
2. RT-PCR扩增性能的比较(灵敏度的比较)
将已知量的E.coli来源的ClpB RNA与HeLa细胞来源的total RNA(1μg)混合，使用各公司高保真性RT-PCR试剂盒进行检测，进行了灵敏度的比较。
结果显示，ReverTra -Plus-TM 的检测灵敏度比其他公司的高保真性RT-PCR试剂盒高出10倍以上。
1) M. Takagi, et al., Appl. Environ. Microbiol., 63: 4504-4510(1997)
2) H. Hashimoto, et al., J. Biochem.(Tokyo), 125: 983-986(1999)
3) H. Mizuguchi, et al., J. Biochem.(Tokyo), 126: 762-768(1999)
4) H. Hashimoto, et al., J. Mol. Biol., 306: 469-477(2001)
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