PCR
本品为含有Taq DNA Polymerase的2×Master Mix(可进行热启动、并加入了电泳染料)。 只要加入模板DNA及引物,即可进行PCR,反应产物可直接进行电泳分析。 预先将Taq抗体加入到Master Mix中,通过热启动效果,可进行高特异性、高效率扩增。 | |
●2×Pre Mix(添加染料) | |
1. 使用直接克隆PCR进行插入片段的检测
用含有500bp插入片段的质粒pTA2进行转化大肠杆菌DH5α,以得到的克隆为样品,在载体上设计引物进行PCR。
结果显示,可以得到跟插入片段长度相同的明亮的条带。
由此可见,使用本品进行直接克隆PCR,也可以得到良好的结果。
2. 人p53基因(2.9 kb)的扩增
以人基因组DNA(50ng)为模板,以较难扩增的人p53基因(2.9kb)为目的片段进行扩增。结果可见,使用Quick Taq HS Dye Mix可得到最高效率和最高特异性。另外,可知在不采用热启动法的情况下(3、4泳道),特异性及灵敏度都很低(Quick Taq HS Dye Mix采用热启动法)。
3. 各种条件下扩增效率的比较
以人基因组DNA (50ng)及大肠杆菌菌落为模板,扩增人的β-globin基因(1.3kb, 3.6kb)、及质粒插入片段(3.9kb)。
反应分别按各试剂的最适条件进行。
结果显示,使用Quick Taq HS Dye Mix时,可进行高效率且高特异性地扩增。
1) F. C. Lawyer et al., J. Biol. Chem., 264: 6427-6437(1989)
2) D. E. Kellogg, et al., BioTechniqus, 16: 1134(1994)
温馨提示:因厂家更改产品包装、产地或者更换随机附件等没有任何提前通知,且每位咨询者购买情况、提问时间等不同,为此以下回复仅对提问者3天内有效,其他网友仅供参考!若由此给您带来不便请多多谅解,谢谢!
服务热线
0771-3293894