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Realtime PCR
本产品是在 Taq DNA polymerase 基础上开发的通用性很高的Realtime PCR 用 2×浓度的预混液。可获得重复性良好的结果。
各试剂分别按以下所示进行使用。
| 产品名 | 用途 | 是否有passive reference校正 | 是否可用于玻璃毛细管 | 能否用于一步法RT-PCR* | 可靠性 |
| Realtime PCR Master Mix | 探针法** | 有 | 可 | 可 | ☆☆☆ |
| SYBR® Green Realtime PCR Master Mix | SYBR® Green法 | 有 | 可 | 可 | ☆☆☆ |
| SYBR® Green Realtime PCR Master Mix -Plus- | SYBR® Green法 | 有 | 可 | 不可 | ☆☆☆☆ |
●高特异性
为了抑制非特异性反应，本产品采用了抗Taq聚合酶抗体的热启动法。
●适用于各种用途
可用于探针分析法及SYBR® Green I分析法。
●适用于各类仪器
产品中还添加了 Passive Reference，可应用于需要校正的仪器（Applied Biosystems®、StepOnePlusTM等）。
还可用于使用玻璃毛细管类型的检测仪器（Roche Diagnostics公司的LightCycler®等）。
●提高了可靠性 [SYBR® Green Realtime PCR Master Mix -Plus-(QPK-212)]
通过对组分的最优化，抑制了SYBR® Green 分析时引物二聚体等问题的产生，提高了可靠性和重复性。
●使用了高纯度Taq DNA polymerase
PCR的基本性能得到了改善。
1. SYBR® Green 分析体系与其他公司产品的反应性能比较
本例将SYBR® Green 分析体系与其他公司产品的反应性能进行了比较。首先将人的基因组DNA各作10倍梯度稀释（从30ng到3pg的5个梯度），以稀释液为样品进行PCR，扩增β-actin基因。结果显示，使用本产品时，在扩增效率及起峰早晚方面有显著优势。另外，引物二聚体的产生也不明显。
（仪器：使用BioFlux公司的LineGene）
2. 相关性分析的讨论
使用本公司的逆转录试剂盒ReverTra Ace -α-®，以HeLa细胞来源的Total RNA(100ng)为模板，使用random primer合成1st strand cDNA之后，稀释10倍后作为标准品，各作5倍梯度稀释，检测β-actin基因。结果显示，所有浓度都得到了良好的扩增曲线。
（使用Roche公司的LightCyclerTM）
3. 与其他公司产品性能的比较【相关性】
啮齿类动物来源的基因组DNA（以10倍稀释系列：10ng、1ng、0.1ng、0.01ng(n=2)）为模板，通过相关性分析进行目的基因（约80bp）的检测。结果显示，A公司的试剂产生了非特异性扩增及引物二聚体，但用SYBR® Green Realtime PCR Master Mix -Plus-却得到了良好的扩增。另外，Ct值的间隔也是相等的，可定量扩增区域也非常广。
（仪器：使用BioFlux公司的LineGene）
4. TaqMan® 法的应用
使用本公司的逆转录试剂盒ReverTra Ace -α-®，以HeLa细胞来源的Total RNA(100ng)为模板，使用random primer合成1st strand cDNA之后，稀释10倍后作为标准品，各作5倍梯度稀释，使用Applied Biosystems公司的Pre-Developed TaqMan® Assay Reagents对β-actin进行TaqMan®法检测。结果显示，所有浓度都得到了良好的扩增曲线。没有扩增的曲线是空白对照（蒸馏水）。
（仪器:使用ABI PRISM® 7700）
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