产品说明:
改进的经典CTAB植物DNA抽提液内(添加多种针对植物特点的多糖、多酚去除成份)迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,氯仿抽提后通过离心清除多糖、多酚和蛋白,然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 进一步将多糖,多酚和细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。
注意事项:
◆ 所有的离心步骤均在室温完成,使用离心力可以达到10,000×g的高速离心机。
◆ 开始实验前将需要的水浴先预热到65℃备用。
◆ 需要自备β-巯基乙醇。
◆ Buffer P3 和HB buffer中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
◆ 不同来源的植物组织材料中提取的DNA 的量会有差异,一般1g新鲜组织典型产量可达30-250μg。
◆ 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA, 不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱,但应该确保PH大于7.5, PH过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA应该保存在-20℃。DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl, 1mM EDTA,PH 8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
试剂盒特点:
◆ 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
◆ 不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
◆ 快速,简捷,单个样品操作一般可在1小时内完成。
◆ 数种去多糖、多酚成份和多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9,长度可达30Kb-50kb,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应。