产品简介:
本产品为一管式预混Mix,使得cDNA 的合成更加的方便快捷。4×FQ-RT Super Mix 中含有RT-PCR 中反转录反应所需的所有试剂(FastQuant RT Enzyme、RNase Inhibitor、Randomprimers、Oligo dT primer、dNTP Mixture、反应Buffer),加入模板RNA 和RNase-Free ddH2O 即可进行反应。本产品使用高效反转录酶FastQuant RT Enzyme,可以在较短时间内高效合成Real Time PCR 所用的模板cDNA,特别适合cDNA合成以后的两步法Real Time PCR 检测。
产品特点:
■ 便捷:本产品为预混Mix 形式,只需加入模板RNA 和水便可以进行反应。
■ 快速:只需42℃,18 min 即可完成cDNA 第一链的合成。
■ 高效:反转录效率可达90% 以上。
■ 普适:通读GC 含量高,二级结构复杂的RNA 模板。
下游应用
■ RT-PCR
■ RT-qPCR
■ cDNA 文库构建
保存条件
-20℃保存
实验例:
1. 使用KR108反转录人类细胞系293T的总RNA。以得到的cDNA为模板,分别扩增不同长度目的基因,用1%琼脂糖凝胶电泳检测。结果表明,KR108能够高效反转录至少5 kb的片段。
RNA使用量为1 μg;电泳条件为6 V/cm, 20 min。M:TIANGEN Marker IV
2. 使用KR108反转录人类细胞系293T的总RNA。按10的倍数稀释得到的cDNA模板,使用染料法试剂对人类GAPDH基因进行qPCR检测。结果显示,KR108反转录能得到高质量的cDNA,适用于染料法qPCR检测目的基因的含量。
RNA使用量为1 μg,荧光定量所用试剂为TIANGEN SuperReal PreMix Plus(SYBR Green) (FP205),使用仪器为 ABI 7500 Fast qPCR System。图中分别展示扩增曲线(A),标准曲线(B)和熔解曲线(C)。
3. 使用KR108反转录人类细胞系293T的总RNA。按10的倍数稀释得到的cDNA模板,使用探针法试剂对人类GAPDH基因进行qPCR检测。结果显示,KR108反转录能得到高质量的cDNA,适用于探针法qPCR检测目的片段的拷贝数。
RNA使用量为1 μg,荧光定量所用试剂为TIANGEN SuperReal PreMix(Probe)(FP206),使用仪器为 ABI 7500 Fast qPCR System。图中分别展示扩增曲线(A)和标准曲线(B)。