产品简介

    TIANSeq HiFi Amplification Mix是一种新型高保真PCR扩增预混液，适用于高通量测序文库的PCR扩增和其他PCR相关的克隆和检测。
    扩增预混液中的Ultra HiFi DNA Polymerase是通过定向分子进化技术开发得到的新型快速高保真DNA聚合酶，增强了DNA聚合酶对模板的亲和力，使得此酶在扩增速度和延伸能力上得到了提升，增加了PCR成功率和产物量。同时，此酶具有优良的3'- 5'外切酶活性（Proofreading活性），保真性可达市场上主流产品水平，保证了基因和文库扩增过程中的真实性。此外，本产品中的DNA聚合酶具有热启动（Hot Start）功能，可有效的控制低温情况下的非特异扩增和酶活损耗，进而保证了PCR扩增的特异性和稳定性。
本产品为一管式预混Mix形式，内含热启动型的Ultra HiFi DNA Polymerase、超纯dNTPs、MgCl2、反应缓冲液等PCR反应所需组分，只需加入模板和引物即可进行PCR扩增反应，操作简便。除此之外，预混Mix中还整合了PCR反应增强系统，不但提高了预混Mix的稳定性，使得聚合酶对PCR反应抑制剂的耐受能力增强，还提高了Ultra HiFi DNA Polymerase对不同GC含量模板的适应能力，使得本产品具有广泛的样品普适性和模板投入范围，有效降低PCR反应的偏好性。
   本产品的PCR产物为平末端，可加A处理再与T载体连接或直接使用平末端克隆载体进行基因克隆，如TIANGEN零背景快速连接试剂盒（目录号：VT205）。

保存条件

    请将试剂盒置于-25~-15℃保存，避免反复冻融。保质期为一年。

产品特点

 扩增快速：延伸速度可达10-15 sec/kb；  延伸力强：可扩增长至15 kb的DNA片段；
 特异性好：具有热启动功能，可用于多重PCR；
 灵敏度高：模板用量可低至10 pg；
 偏好性低：针对不同GC含量的模板都有均衡的扩增效果；
 应用广泛：可用于高通量测序文库的PCR扩增和其他PCR相关的克隆和检测。

适用范围

    用于DNA的高保真快速扩增，如基因表达克隆、基因定点突变、基因组点突变的分析 （SNP）等；更可用于高通量测序中，如高保真基因组DNA文库的富集。 

实验例

实验1

使用分子信标法（Ma et al., Anal Biochem, 2006）检测不同高保真酶的热启动性。所有产品均宣传其具有热启动能力，但检测结果表明这些产品中只有UltraHiFi在95度时才被激活，其余产品在40-50度时均有链退火和延伸能力。

实验2

实验3

实验4

实验5