产品简介

本产品是一种高效、稳定、快速并可以去除基因组DNA 污染的反转录预混Mix。5× FastKing-RT SuperMix 中不但含有RTPCR中反转录反应所需的所有试剂，还含有高效去除基因组DNA 的热敏gDNase。FastKing RT Enzyme 是通过分子改造后的新型反转录酶，在通读GC 含量高，二级结构复杂的RNA 模板和抗逆性等方面的表现突出；热敏的gDNase 生效快，效率高，作用时间短，在处理残留基因组DNA 之后不会对cDNA 造成影响。二者结合使用，可使残留基因组的去除与反转录反应同时进行，极大方便了反转录操作。

产品特点

■ 快速：仅需加入模板，18 分钟一步法完成去基因组和高效反转录

■ 高效：修饰了疏水motif，反转效率超过95%

■ 灵敏：低至1 ng 的模板也能被准确识别

■ 简洁：采用热敏DNase，见效快，效率高，时间短，不会对cDNA 产生影响

下游应用

反转录后的cDNA 可用于常规PCR，荧光定量PCR，cDNA 文库构建，

SAGE（基因表达连续分析），引物延伸等多种常规实验。

适用范围

RT-PCR；荧光定量RT-PCR；cDNA文库构建；SAGE(基因表达连续分析)；引物延伸。

实验例

实验例 1. 分别使用 TIANGEN KR118、国外 A 公司和国内 B 公司的一步法反转定量试剂合成cDNA，使用 TIANGEN FP209检测小鼠 RN5 基因，展示扩增曲线、熔解曲线和标准曲线。结果显示，TIANGEN KR118 反转录得到的 cDNA 量大，扩增 Ct靠前，特异性高，梯度优秀，特别对于低丰度模板的检测优于其他竞争试剂。

实验例 2. 分别使用 TIANGEN KR118、国外 A 公司和国内 B 公司的一步法反转定量试剂合成 cDNA，使用 TIANGEN FP209 检测人类 HsG 基因，并且人为添加不同浓度的基因组 DNA，检测不同试剂对基因组 DNA 的去除能力。Ct 结果显示，TIANGEN KR118 具有优秀的基因组 DNA 去除能力，多至 500 ng 的基因组 DNA 残留也能有效去除，不会对结果造成影响。ND：未检出。NRT：不做反转录，直接用混合物定量检测。