BL21(DE3)、Rosetta、OrigamiB(DE3) 等一系列原核表达菌株均来源于BL21菌株。该菌株主要用于非毒性蛋白的表达,不含T7 RNA聚合酶,所以不能用于由T7启动子驱动的蛋白表达(如:pET系列);但含有大肠杆菌RNA聚合酶,可以用于tac或trc等使用大肠杆菌RNA聚合酶的原核系统的表达,如:pGEX, pMAL。
适用于毒性蛋白的表达,适用于Tac启动子系统,如:pGEX, pMAL。
1.-80°C冰箱内取出E.coli BL21 Competent Cells,迅速插入冰盒内,使其溶解。2.加入DNA样品轻轻混匀,冰中放置30分钟。3.42°C水浴热激45秒,迅速放回冰中放置2分钟,注意不要晃动。添加700ul不含抗生素的无菌培养基,混合均匀。4.37℃振荡培养1小时(160-225rpm),吸取适量体积均匀涂布到含相应抗生素的LB琼脂培养基平板中。37℃正置至液体被吸收,然后倒置过夜培养。
E.coli BL21 Cells 5 x 100ul/10 x 100ul,pUC19 plasmid (0.1ng/μl) 10ul
规格 | 5 x 100ul/10 x 100ul |
转化效率 | 使用pUC19质粒检测,转化效率可达10^7cfu/μg DNA。 |
保存条件 | 长期储存于-80°C,可保存半年,避免反复冻融。 |
其它
储存:超低温(-80℃)
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