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高通量、小规模纯化His-tagged蛋白，利用His标签进行多种磁捕获研究
Ni-NTA Magnetic Agarose Beads是表面包被Ni-NTA Agarose亲和纯化基质的磁性颗粒，可固定和纯化带有His标签的重组蛋白。His标签上的组氨酸残基高特异性的结合到固定的镍离子上，一旦蛋白结合后，磁珠通过磁力被沉淀下来，洗去杂质，最后蛋白在天然或变性条件下经小体积洗脱得到。
QIAexpress Ni-NTA Protein Purification System包括Ni-NTA Magnetic Agarose Beads（参见Micrograph of Ni-NTA Magnetic Agarose Beads），是基于获得专利的Ni-NTA（氨基三乙酸镍）树脂对含有6个或以上组氨酸残基（连续或交替）的亲合标签的蛋白的强选择能力。该技术可在天然或变性条件下，一步纯化几乎所有His-tagged蛋白（参见Protein purification with the Ni-NTA protein purification system）。NTA含有四个镍离子螯合位点，与镍的结合能力比其他仅有三个金属螯合位点的金属螯合纯化方法的结合能力强。多出的一个螯合位点可防止镍离子浸出，因此具有更强的结合能力，制备的蛋白纯度比金属螯合纯化方法的蛋白纯度高。QIAexpress技术适用于从杆状病毒、哺乳动物细胞、酵母和细菌中纯化His-tagged蛋白。
纯化His-tagged蛋白包括4个步骤：细胞裂解，蛋白结合，洗涤和洗脱。利用QIAexpress体系纯化重组蛋白并不依赖于蛋白或His标签的三维空间结构。这一特性使Ni-NTA可在天然或变性条件下，从稀释溶液或裂解液中一步纯化蛋白。另外，可使用强变性剂和洗涤液对受体、膜蛋白和包涵体蛋白进行高效的溶解和纯化。可在洗涤液成分中加入高效去除非特异性结合的各种试剂（参见下表）。最后通过在温和条件下加入100–250 mM咪唑或降低pH值，洗脱得到纯化蛋白。
| 变性剂 | 洗涤液 | 还原剂 | 其他 | 盐 | 长期储存 |
|---|---|---|---|---|---|
| 6 M Gu·HCl | 2% Triton X-100 | 20 mM β-ME | 50%甘油 | 4 M MgCl2 | 至多30%的乙醇 |
| 8 M尿素 | 2% Tween 20 | 10 mM DTT | 20%乙醇 | 5 mM CaCl2 | 或100 mM NaOH |
| 1% CHAPS | 20 mM TCEP | 20 mM咪唑 | 2 M NaCl |
QIAexpress Ni-NTA Protein Purification System，包括Ni-NTA Magnetic Agarose Beads，可以可靠的一步纯化蛋白，产物适用于以下应用：
| Features | Specifications |
| 应用 | Proteomics |
| 磁珠大小 | 20–70 µm |
| 结合能力 | Up to 2 mg/ml suspension (5%) |
| 处理 | Automated/manual |
| 规格 | Micro scale |
| 特性 | High throughput (96-well) |
| 起始材料 | Cell lysate |
| 支持/基质 | Magnetic agarose beads |
| 标签 | 6xHis tag |
| 产量 | <10 mg protein per column |
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