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Qiagen 凯杰 Biosharp Omega

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图片仅供参考,请以实物为准
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Qproteome Cell Compartment Kit

价:
4910.00
价:
¥3928.00

号:37502

牌:Qiagen 凯杰

账期 货到付款

EA (预计3-5工作日到货)

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根据亚细胞定位进行蛋白分步抽提

  • 高重复性分离细胞蛋白组分
  • 可监测不同细胞生长状态下蛋白质的定位情况
  • 在进一步纯化和分析之前,根据亚细胞定位富集特定蛋白组分
0
检测不同生长条件的细胞中的蛋白位置。
[A] 在正常生长条件和 [B] 加入一种凋亡诱导剂——星孢菌素4小时后的HeLa细胞的显微图片(上图)。下图显示了使用Qproteome Cell Compartment Kit处理细胞裂解物后的Western印迹。使用抗细胞色素c抗体检测印迹。众所周知,在凋亡过程中细胞色素c会从线粒体膜间隙易位至胞浆中,该过程可以通过检测凋亡细胞胞浆部分的细胞色素c反映出来。
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流程图。
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特异性分离蛋白。
NIH 3T3细胞各组分的Western印迹。采用SDS-PAGE从细胞浆(C)、细胞膜(M) 和细胞核(N) 中分离蛋白质(20 µg)。Western印迹后,使用 [A] 膜联蛋白、 [B] TIM23和 [C] 核纤层蛋白抗体以及HRP偶联的二抗进行化学发光检测,检测各组分的特异性蛋白。
3
定位组织样本中的蛋白。
使用Qproteome Cell Compartment Kit处理图示的大鼠组织。采用SDS-PAGE分离各组分( C:细胞浆, M:细胞膜, N:细胞核, S:细胞骨架),并通过Western印迹转移至硝酸纤维素膜上。采用标示细胞区室特异性的标记蛋白抗体检测印迹。
Performance
Qproteome Cell Compartment Kit利用简单有效的细胞间隔特殊定位法,从分离的细胞中定位标记蛋白(参见" Specific Separation of Marker Proteins" 和" Localization of Proteins in Cells Under Different Growth Conditions") 或者从组织样本中定位(参见" Localization of Proteins in Tissue Samples")。
Principle

试剂盒中包括4种提取缓冲液,能够从细胞裂解物或组织的细胞质、细胞膜、细胞核,以及细胞骨架相关的蛋白质顺序隔离。

Procedure

4种抽提试剂依次加入到细胞沉淀中并且离心分离出相应的片段(参见flowchart)。

另有组织样本实验流程可供选择,样本可在处理细胞沉淀操作前,用TissueRuptor在破碎的同时匀浆。

Applications

根据蛋白的亚细胞定位,对样本中的蛋白质进行分步抽提可以最大程度的富集低丰度蛋白。可用于研究酶、调控蛋白和结构蛋白的亚细胞定位情况;监测不同条件下蛋白在细胞内分布情况。

Features
Specifications
应用 SDS-PAGE, mass spectrometry
结合能力/产量 Varies
分离组分 Four fractions
样本大小 ~5 x 10e6 cells
物种 Eukaryotes
起始材料 Cell lysate

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