产品明细:
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详细说明:
RNAlater使用方法
动物组织:将厚度小于 0.5 厘米的新鲜样品 (如果厚度大于 0.5 厘米,先切薄) 浸入 5-10 倍
体积的 RNAlater 中。
培养细胞:先离心去除培养液,再用 PBS 洗涤一次。在细胞沉淀中加入少量 PBS,使细胞悬浮,
再加入 5-10 倍体积的 RNAlater,颠倒离心管混匀。
白细胞:先去除红细胞,再按培养细胞一样的办法处理。
细菌:同培养细胞。
样品保存说明 :
-20oC:可以保存一年以上。
先将浸泡有样品的 RNAlater 置于 4oC 冰箱后,再移入 -20oC 以下冰箱保存。在此
条件下可能会出现盐析,不用管它,因为它不影响 RNA 的完整性。由于用 RNAlater保存
的样品的反复冻融 (10 次以上) 不影响 RNA 的完整性,故实验前可以放心地将样品从冰
箱中取出。割下实验需要的量,多余的重新放回 RNAlater 中保存。
4oC:可以保存一个月。
将浸泡有样品的 RNAlater 直接放入 4oC 冰箱即可。
25oC:可以保存一个星期。10 天后开始出现降解。
37oC:可以保存一天。第三天开始出现较明显的降解。
保存样品抽提前处理方法 :
组织:
将组织用镊子从 RNAlater 中取出,必要的话可以进行切割,称重。再放入裂解液中,
迅速彻底匀浆。要注意的是,一旦组织放入裂解液中后,残留的 RNAlater 对 RNA
的保护将减弱,所以必须迅速而彻底地匀浆。
细胞:
由于 RNAlater 的密度较大,沉淀保存于 RNAlater 中的细胞需要更大的离心力。虽
然经过 RNAlater 处理后的细胞可以耐受 5,000x g 的离心力,但我们建议使用
3,000x g 的离心 5–10 分钟沉淀细胞。如果沉淀不下来,有两个解决办法:
1:将离心力提高至 5,000x g;
2:加入等体积的 PBS,混匀后 3,000x g 离心。
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