BeyoTaq DNA Polymerase简称BeyoTaq酶,是一种兼顾了高保真性和高扩增效率的DNA聚合酶,是碧云天优先推荐的基因PCR克隆用酶。
BeyoTaq酶可以催化5’至3’方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合。同时BeyoTaq酶有3’至5’的外切酶活性
(proofreading activity)。另外,BeyoTaq酶有5’至3’外切酶活性,但BeyoTaq酶没有反转录酶活性。
由于BeyoTaq酶有3’至5’的外切酶活性,因此在PCR扩增过程中出错的几率大大降低,出错率为1.6×10-6 per nt per
cycle,略低于Pfu酶的2.6×10-6 per nt per cycle。
BeyoTaq酶的DNA扩增效率大大高于Pfu酶,和Taq酶的扩增效率比较接近。因此BeyoTaq酶很好地兼顾了扩增效率和扩增的准确性。
用途:高保真PCR (high fidelity PCR)、点突变、T载体克隆等各种常规PCR反应。
用BeyoTaq酶扩增产生的PCR产物带有3’-dA overhangs,可以用于基于T载体的PCR片段克隆。
BeyoTaq酶可以扩增长度达5kb的DNA片段,最长可以扩增长达10kb的DNA片段。通常适合扩增3kb以下的DNA片段。
活性定义:One unit of the enzyme catalyzes the incorporation of 10 nmol of deoxyribonucleotides into a
polynucleotide fraction (adsorbed on DE-81) in 30 min at 72℃. Enzyme activity is assayed in the following mixture: 20 mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25℃), 2 mM MgSO4, 10 mM (NH4)2SO4, 10 mM KCl, 0.1% (v/v) Triton X-100, 0.1 mg/ml BSA, 0.75 mM activated calf thymus DNA, 0.2 mM of each dNTP, 0.4 MBq/ml [3H]-dTTP.
纯度:不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶,不含RNA酶,满足常规PCR反应要求。
酶储存溶液:20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 100 mM KCl, 0.1% (v/v) Nonidet P40, 0.1% (v/v)
Tween 20 and 50% (v/v) glycerol。
10X BeyoTaq Buffer (with Mg2+):200 mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25℃), 100 mM (NH4)2SO4, 100 mM KCl, 20 mM
MgSO4, 1% (v/v) Triton X-100, 1 mg/ml BSA。
失活或抑制:酚氯仿抽提可以使BeyoTaq酶失活。
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D7219-1 | BeyoTaq DNA Polymerase (5U/μl) | 1000U |
D7219-2 | 10X BeyoTaq Buffer (with Mg2+) | 1ml×5 |
— | 说明书 | 1份 |
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
由于PCR反应非常灵敏可以扩增目的基因序列超过1000万倍,在使用BeyoTaq酶时请注意避免微量待扩增DNA的污染,并尽量考虑设置不加模板的空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染。
BeyoTaq酶有3’至5’的外切酶活性,在没有dNTP的情况下可以降解引物。因此BeyoTaq酶一定要最后加入,并且要在冰浴上操作。
不能使用Taq酶的PCR Buffer来替代BeyoTaq酶的PCR Buffer。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
试剂 | 最终浓度 | 体积 |
双蒸水或Milli-Q水 | - | (36.75-x)μl |
10X BeyoTaq Buffer (with Mg2+) | 1X | 5μl |
dNTP (2.5mM each) | 0.2mM each | 4μl |
模板DNA | 10pg-1μg* | xμl |
引物混合物(10μM each) | 0.8μM | 4μl |
BeyoTaq DNA Polymerase (5U/μl) | 1.25U/50μl | 0.25μl |
总体积 | - | 50μl |
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