碧云天生产的10X CutEZ™ Buffer是一种能让超过200种限制性内切酶的活性达到100%的缓冲液。使用CutEZ™ Buffer,可以免去内切酶酶切时选择buffer的麻烦,特别是在双酶切时会变得更加简单易行。此外,许多DNA修饰酶在CutEZ™ Buffer中也保留了100%酶活性,这样在酶切后进行DNA修饰酶处理就无需进行DNA纯化了。
各种内切酶和修饰酶在1X CutEZ™ buffer中的活性,请参考附录1和附录2。
不同来源的限制性内切酶对于CutEZ™ Buffer的兼容性可能略有不同。
1X CutEZ™ Buffer的组分为50 mM Potassium acetate, 20 mM Tris-acetate, 10 mM Magnesium acetate, 100 μg/ml BSA, pH 7.9 @ 25℃,与NEB公司的CutSmart™ Buffer完全一致。
一个包装的本产品,如果用于20μl的酶切反应体系,共可以用于2500个酶切反应。
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D6018 | 10X CutEZ™ Buffer | 1ml×5 |
— | 说明书 | 1份 |
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
使用前,反应缓冲液应彻底融化并混匀。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1.根据酶切反应体系加入总体积1/10的10X CutEZ™ Buffer,使其终浓度为1X,待所有组分都加入完毕,混匀后即可置于适当的温度中进行酶切反应。
附录1:
常用限制性内切酶在CutEZ™ Buffer中的活性和效能表如下:
Enzyme | Sequence | % Activity in CutEZ™ | Heat Inac. | Incu. Temp. | Dam | Dcm | CpG | Unit Substrate |
AatII | GACGT/C | 100 | 80℃ | 37℃ | ● | ● | ■ | λ DNA |
Acc65I | G/GTACC | 25 | 65℃ | 37℃ | ● | □ scol | □ scol | pBC4 DNA |
AccI | GT/MKAC | 100 | 80℃ | 37℃ | ● | ● | □ ol | λ DNA |
AciI | CCGC(-3/-1) | 100 | 65℃ | 37℃ | ● | ● | ■ | λ DNA |
AclI | AA/CGTT | 100 | No | 37℃ | ● | ● | ■ | λ DNA |
AcuI | CTGAAG(16/14) | 100 | 65℃ | 37℃ | ● | ● | ● | λ DNA |
AfeI | AGC/GCT | 100 | 65℃ | 37℃ | ● | ● | ■ | pXba DNA |
AflII | C/TTAAG | 100 | 65℃ | 37℃ | ● | ● | ● | ΦX174 RF I DNA |
AflIII | A/CRYGT | 50 | 80℃ | 37℃ | ● | ● | ● | λ DNA |
AgeI | A/CCGGT | 75 | 65℃ | 37℃ | ● | ● | ■ | λ DNA |
AhdI | GACNNN/NNGTC | 100 | 65℃ | 37℃ | ● | ● | ◊ scol | λ DNA |
AleI | CACNN/NNGTG | 100 | 80℃ | 37℃ | ● | ● | ◊ scol | λ DNA |
AluI | AG/CT | 100 | 80℃ | 37℃ | ● | ● | ● | λ DNA |
AlwI | GGATC(4/5) | 100 | No | 37℃ | ■ | ● | ● | λ DNA (dam-) |
AlwNI | CAGNNN/CTG | 100 | 80℃ | 37℃ | ● | □ ol | ● | λ DNA |
ApaI | GGGCC/C | 100 | 65℃ | 25℃ | ● | □ ol | □ ol | pXba DNA |
ApaLI | G/TGCAC | 100 | No | 37℃ | ● | ● | □ ol | λ DNA/HindIII |
ApeKI | G/CWGC | 10 | No | 75℃ | ● | ● | λ DNA | |
ApoI | R/AATTY | 75 | 80℃ | 50℃ | ● | ● | ● | λ DNA |
AscI | GG/CGCGCC | 100 | 80℃ | 37℃ | ● | ● | ■ | λ DNA |
AseI | AT/TAAT | 10 | 65℃ | 37℃ | ● | ● | ● | λ DNA |
AsiSI | GCGAT/CGC | 100 | 80℃ | 37℃ | ● | ● | ■ | pXba/XhoI |
AvaI | C/YCGRG | 100 | 80℃ | 37℃ | ● | ● | ■ | λ DNA |
AvaII | G/GWCC | 100 | 80℃ | 37℃ | ● | □ ol | □ ol | λ DNA |
AvrII | C/CTAGG | 100 | No | 37℃ | ● | ● | ● | λ DNA/HindIII |
BaeI | (10/15)ACNNNNGTAYC(12/7) | 100 | 65℃ | 25℃ | ● | ● | □ scol | pXba DNA |
BamHI | G/GATCC | 100* | No | 37℃ | ● | ● | ● | λ DNA |
BanI | G/GYRCC | 100 | 65℃ | 37℃ | ● | □ scol | □ scol | λ DNA |
BanII | GRGCY/C | 100 | 80℃ | 37℃ | ● | ● | ● | λ DNA |
BbsI | GAAGAC(2/6) | 75 | 65℃ | 37℃ | ● | ● | ● | λ DNA |
BbvCI | CCTCAGC(-5/-2) | 100 | No | 37℃ | ● | ● | ◊ ol | λ DNA |
BbvI | GCAGC(8/12) | 100 | 65℃ | 37℃ | ● | ● | ● | pBR322 (dcm+) DNA |
BccI | CCATC(4/5) | 100 | 65℃ | 37℃ | ● | ● | ● | pXba DNA |
BceAI | ACGGC(12/14) | 100* | 65℃ | 37℃ | ● | ● | ■ | pBR322 (dcm+) DNA |
BcgI | (10/12)CGANNNNNNTGC(12/10) | 50* | 65℃ | 37℃ | ◊ ol | ● | □ scol | λ DNA |
BciVI | GTATCC(6/5) | 100 | 80℃ | 37℃ | ● | ● | ● | λ DNA |
BclI | T/GATCA | 75 | No | 50℃ | ■ | ● | ● | λ DNA (dam-) |
BfaI | C/TAG | 100 | 80℃ | 37℃ | ● | ● | ● | λ DNA |
BfuAI | ACCTGC(4/8) | 10 | 65℃ | 50℃ | ● | ● | ◊ ol | λ DNA |
BglI | GCCNNNN/NGGC | 10 | 65℃ | 37℃ | ● | ● | □ scol | λ DNA |
BglII | A/GATCT | 10 | No | 37℃ | ● | ● | ● | λ DNA |
BlpI | GC/TNAGC | 100 | No | 37℃ | ● | ● | ● | λ DNA |
BmgBI | CACGTC(-3/-3) | 10 | 65℃ | 37℃ | ● | ● | ■ | λ DNA |
BmrI | ACTGGG(5/4) | 100* | 65℃ | 37℃ | ● | ● | ● | λ DNA/HindIII |
BmtI | GCTAG/C | 100 | 65℃ | 37℃ | ● | ● | ● | pXba DNA |
BpmI | CTGGAG(16/14) | 100 | 65℃ | 37℃ | ● | ● | ● | λ DNA |
Bpu10I | CCTNAGC(-5/-2) |
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