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只需一个水浴锅，轻松检测支原体！
MycoBlueTM Mycoplasma Detector
• 取1 μl培养上清直接检测，不需要样品预处理
• 无需PCR仪等仪器，1 h即可通过颜色判定结果
• 产物不需要电泳，避免出现假阳性
• 颜色区分明显，无弱阳性/假阴性
• 准确性媲美qPCR，优于PCR法
• 可检测多达28种支原体
MycoBlueTM Mycoplasma Detector是专门针对细胞培养物支原体污染快速检测的试剂，使用简便快捷，只需吸取1 μl细胞培养上清加入反应体系中，60℃孵育1 h，肉眼观察即可判定结果。无需PCR/qPCR仪，无需电泳，在细胞房内即可轻松完成。与常用的PCR法相比，MycoBlueTM Mycoplasma Detector对培养上清中的抑制物耐受度更强，因此不会出现弱阳性、假阴性；反应完成后无需开盖电泳，避免了扩增产物气溶胶造成的假阳性；检测结果与目前最灵敏、最准确的定量PCR法具有极高的一致性。MycoBlueTM Mycoplasma Detector适用于各种悬浮、贴壁培养细胞，并对培养基、血清种类具有广泛兼容性。经验证的细胞和培养基血清包括（但不限于）：经验证，MycoBlueTM Mycoplasma Detector可检测多达28种支原体，包括细胞培养常见的8种支原体；适用于各种悬浮、贴壁培养细胞，包括CHO，Vero，杂交瘤，Sf9，293等，且具有广泛的培养基、血清兼容性，因此非常适合于生物制药企业、疫苗生产企业、单抗生产企业、细胞治疗/胚胎实验室以及科研实验室的日常支原体检测。
1.MycoBlueTM Mycoplasma Detector的灵敏度是多少？如何保证检测灵敏度？
MycoBlueTM Mycoplasma Detector可从1 μl培养上清中准确检出至少500 cfu的支原体，即灵敏度为5 × 105cfu/ml。通常情况下，培养上清中的支原体含量在106-108 cfu/ml之间，该试剂可以满足绝大多数实验的需要。据文献报道，单个支原体感染细胞后，在3-5天内可扩增至106cfu/ml。因此，尽量在换液或传代3天后再进行检测，以使上清中的支原体含量增多，提高检出率。
2.加入培养基上清后，反应液即变色；或者反应结束后，反应液颜色呈现紫色与蓝色以外的颜色，是什么原因？如何解决？
在极少数情况下，培养基成分会对MycoBlue试剂的颜色产生干扰，比如Cell Boost 5 (Hyclone)会使MycoBlue试剂呈现出粉红色。
处理方法：①取少量培养上清或细胞悬液，500 g离心5 min，收集上清；②高速离心(>12,000 g) 5 min，使上清中可能存在的支原体沉淀。弃掉大部分上清，保留约50 μl；再加入950 μl无菌水，用移液器吹打混匀；③重复步骤②三次，弃掉大部分上清，保留约50 μl；④取1 μl进行检测。
3.操作过程中如何避免出现假阳性？
只要稍加注意，不会出现假阳性。最重要的是反应结束后，不能打开管盖，否则反应产物会产生气溶胶，导致后续检测出现假阳性。另外，加样时注意更换枪头，并将阳性对照放在最后一管加入，也可以进一步降低假阳性出现的风险。
4.如果出现支原体污染该如何补救？
若发现细胞存在支原体污染，建议直接丢弃，防止污染其它细胞。同时，复苏一支同批次冻存的细胞进行检测。如果发现是支原体阳性，则将该批次细胞全部丢弃。
如果细胞很珍贵，可尝试使用Myco-Off支原体清除试剂(Vazyme #D102-01)，对细胞进行挽救。
5.MycoBlueTM Mycoplasma Detector可以检测多少种支原体？
MycoBlueTM Mycoplasma Detector可以准确检出28种支原体：
* 超过95%以上的细胞是被这8种支原体所污染
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