ExFect®2000 Transfection Reagent
高效转染
ExFect2000是一种基于阳离子脂质体的高效转染试剂,适用于DNA的转染及共转体系,对大多数真核细胞(贴壁或悬浮)具有很高的转染效率。独特的结构及配方,使得血清和抗生素的存在不会影响转染效率,从而减少去除血清对细胞的影响。细胞转染后,24-48 h内无需去除核酸-ExFect2000复合物或更换培养基。目前ExFect2000转染试剂已在多种细胞系以及实验体系进行验证,均具有较高的转染效果。
1、如何处理转染效率偏低?
ExFect2000与DNA的比例、DNA用量不合适。通过预实验测试ExFect2000与DNA的最佳比例(在1~3 μl ExFect2000/μg DNA范围内尝试)及DNA的使用量(以24孔板为例,在0.5~1 μg/孔范围内尝试后,如不能满足要求,可适当提高DNA用量,具体可参见表一)。在后续的实验中选择转染效率高、细胞毒性低的比例进行转染。
2、如何减轻转染试剂对细胞的毒性?
ExFect2000/DNA复合物转染后培养时间过长。多数情况下,在完全培养基中进行转染后,24 h内无需进行换液处理;但是培养时间过长可能会导致细胞状态较差,建议根据实验需要,合理安排后续实验时间。同时可以尝试适当降低转染试剂比例调节毒性。
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