[关闭]
您好!欢迎来到炼石商城   请登录  注册    兼职小伙伴  
我的购物车
0
Qiagen 凯杰 Biosharp Omega

首页细胞凋亡Vazyme 诺唯赞>

图片仅供参考,请以实物为准
收藏

TUNEL FITC Apoptosis Detection Kit 100rxn

价:
4080.00
价:
¥0.00

号:A111-03

牌:Vazyme 诺唯赞

账期 货到付款

EA (预计5-7工作日到货)

亲,想了解价格请QQ咨询客服!

工作时间

周一至周五:9:00-18:00

咨询电话

0771-3293894

在线咨询

客服 郭恒 蔡玉坤 曾宪飞 技术咨询

浏览了该商品的用户还浏览了

TUNEL FITC Apoptosis Detection Kit

 

●  经过优化的FITC-12-dUTP与未标记dNTP的比例,提高荧光检测的信噪比和灵敏度

●  高活性的重组TdT酶保证荧光掺入效率

●  适用于细胞爬片、石蜡切片和冰冻切片

 

 

 

 

 

 

 

图1. 果蝇三龄幼虫视盘(eye disc)。凋亡诱导基因Hid在特异性启动子驱动下在果蝇视盘的远端诱导出大量凋亡细胞。

A. TUNEL 染色,标记凋亡细胞。B. ELAV染色,标记所有的感光细胞。C. Merge。 

  

   图2. 人睾丸组织切片经DNase I 处理。

   A. TUNEL染色,标记凋亡细胞。B. PI染色,标记所有细胞核。C. Merge。

 

      细胞凋亡的一个显著特点是细胞染色体的DNA被内源核酸内切酶有规律的降解成长度约为180-200bp的整倍数的片段。本试剂盒采用TUNEL法,应用末端脱氧核糖核苷酸转移酶(TdT)在凋亡细胞断裂的DNA的3′-羟基(3′-OH)末端催化掺入荧光素-12-脱氧三磷酸尿苷(FITC-12-dUTP)。FITC-12-dUTP标记的DNA可以用荧光显微镜直接观察或者用流式细胞仪定量。

 

 

组   分 A111-01 (20 rxn) A111-02 (50 rxn)  A111-03 (100 rxn)
5 × Equilibration Buffer 1.25 ml 1.25 ml × 2 1.25 ml × 3
FITC-12-dUTP Labeling Mix 100 μl 250 μl 250 μl × 2
Recombinant TdT Enzyme 20 μl 50 μl 50 μl × 2
Proteinase K (2 mg/ml) 40 μl 100 μl 100 μl × 2
DNase I (1 U/μl) 5 μl 13 μl 25 μl
10 × DNase I Buffer 100 μl 260 μl 500 μl
 
 
常见问题及解决方案
Q-1:高背景 (如,未凋亡细胞的强绿色荧光背景)
A-1:非特异性掺入FITC-12-dUTP。在操作过程中保持细胞湿润;标记反应完成,载玻片在用PBS洗一遍之后,可再用含0.1% Triton® X-100和5 mg/ml BSA的PBS洗三次,每次5分钟。
 
Q-2:荧光信号弱
A-2:蛋白酶K或Triton® X-100的通透不充分。通过调整通透剂的孵育时间优化通透步骤。
 
Q-3:组织切片从载玻片上脱落
A-3:组织切片粘附之前的包被不充分。在展片之前,用3-氨丙基三乙氧基硅烷(3-aminopropyl triethoxysilane,TESPA;Sigma Cat.# A3648)包被显微镜载玻片比多聚赖氨酸 (poly-L-lysine)效果更好。
 
Q-4:最后显微镜或流式细胞仪分析只剩下很少的细胞
A-4:在操作过程中丢失大量细胞: 提高起始的细胞量; 在制备贴到显微镜载玻片的细胞悬液时,离心过程中用含1%BSA的PBS洗细胞; 在制备细胞悬液时,离心过程中用含1%BSA的PBS洗细胞。

温馨提示:因厂家更改产品包装、产地或者更换随机附件等没有任何提前通知,且每位咨询者购买情况、提问时间等不同,为此以下回复仅对提问者3天内有效,其他网友仅供参考!若由此给您带来不便请多多谅解,谢谢!

我要咨询

咨询内容:
支付方式 货到付款 账期付款

服务热线

0771-3293894