Fast-T1化学感受态细胞
生长快速
图A:使用pUC19质粒DNA分别转化Fast-T1,XL10,DH5α和竞品T1,过夜培养。取单克隆至3 ml LB液体培养基中培养。取相同起始量的各菌液接种至50 ml LB液体培养基中培养,每隔0.5 h检测OD600。
如右图所示:Fast-T1感受态细胞生长速度与竞品T1一致,均高于DH5α和XL10。
图B:使用pUC19质粒DNA分别转化Fast-T1和XL10感受态细胞,测试可见克隆及小量质粒DNA提取所需时间。如右图所示:在氨苄青霉素抗性平板上,培养8-9 h可见克隆;将过夜培养的单克隆在2 ml的LB液体培养基中,培养4-5 h即可进行小量质粒DNA提取。说明Fast-T1感受态细胞的生长速明显快于XL10。
操作简便
对于含氨苄青霉素抗性质粒及连接产物,5 min完成快速转化。
Fast-T1是目前生长速度最快的感受态细胞。外膜受体突变(tonA)赋予感受态细胞对裂解噬菌体T1和T5的抗性;缺失核酸内切酶(endA)提高了质粒DNA的产量和质量;重组酶缺陷型(recA)减少了插入片段的同源重组概率,保证了插入DNA的稳定性;lacZΔM15使Fast-T1感受态细胞可用于蓝白斑筛选。本公司Fast-T1感受态细胞经过特殊工艺制备,广泛适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,使用pUC19质粒DNA检测,转化效率>108 cfu/μg。
组分 |
C505-01 |
C505-02 |
Fast-T1 Competent Cell |
10 × 100 μl |
20 × 100 μl |
基因型:F-φ80(lacZ)ΔM15 ΔlacX74 hsdR(rK- ,mK+) ΔrecA1398 endA1 tonA
保存条件:-70°C保存。
请勿将本产品置于-20 ℃或液氮中保存。
1. 5 min快速转化流程仅适用于含氨苄青霉素抗性载体的转化;若实验需获得较多菌落数,建议采用高效转化。
2. 刚刚解冻的感受态细胞,转化效率最高,故不可在冰上放置时间过长,长时间放置会降低转化效率。
3. 待转化DNA加入体积不要超过感受态细胞体积的1/10。
4. 加入质粒或连接产物后,请勿用移液枪吸打,轻弹混匀即可。
5. 避免将感受态细胞反复冻融。
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