T7 RNAi Transcription Kit

 

• 可以转录siRNA和长片段dsRNA；
• 产量高达20-80 μg；
• RNA磁珠可快速高效的纯化转录产物。
   

 

 

 

图1.  500 bp dsRNA 2%琼脂糖凝胶电泳图

1：DL2000 Plus DNA Marker；

2和4：500 bp dsRNA酶解前后产物（双端转）；

3和5:   500 bp dsRNA酶解前后产物（混合转）。

 

 

 

 

 

图2.  siRNA 12% PAGE电泳检测结果

1： siRNA转录产物；

2： siRNA转录双酶消化产物；

3： 单链模板

4： 双链退火模板 

 

 

 

 

 

 

图3. siRNA干扰绿色荧光蛋白表达。

左图为GFP质粒与negative control GFP siRNA共转染24 h后的293T细胞；右图为GFP质粒和positive GFP siRNA共转染24 h后的293T细胞。

 

 

 

 

T7 RNA ploymerase可识别带有T7启动子的DNA模版，以四种NTP为底物，体外转录合成RNA。T7 RNAi Transcription Kit是在T7 High Yield RNA Transcription Kit基础上为转录双链RNA而设计优化的版本，可用于转录21 bp的siRNA和长片段的dsRNA。转录产物经纯化后可用于阳离子脂质体、磷酸钙共沉淀、电穿孔、DEAE-葡聚糖及显微注射等方法介导的RNAi实验。一般情况下，一个反应可产生20-80 µg的RNA。