HiScript® II One Step qRT-PCR Probe Kit
探针法一步qRT-PCR,提供最高的灵敏度
• 可检测到个位数拷贝的模板或0.1 pg总RNA
• 支持多重探针检测
图1. HiScript® II One Step qRT-PCR Probe Kit (Q222)具有更宽线性范围及更高检测灵敏度。
A. 以1 ng-0.1 pg Hela细胞总RNA为模板,扩增RFLPO基因,线性范围达5个数量级,灵敏度可达0.1 pg。
B. 以107-10拷贝体外转录的RNA为模板,扩增HCV基因,线性范围达7个数量级,灵敏度可达10拷贝。
C. 以10-1-10-7稀释度的鸡胚尿囊液RNA为模板,扩增新城疫病毒特异基因,可稳定检测到10-7稀释度。
低拷贝数模板或弱阳性样本的检出率仍然是临床诊断的挑战之一。HiScript® II One Step qRT-PCR Probe Kit含有最佳比例的HiScript® II Reverse Transcriptase和Champagne TaqTM DNA Polymerase,以及充分优化的缓冲体系,无论是总RNA,体外转录RNA,或者是病毒RNA,HiScript® II One Step qRT-PCR Probe Kit都具有极高的灵敏度,提供稳定可靠的扩增表现。无需过多优化,亦可实现多重扩增。
组分说明:
组分 | Q222-01 250 rxn (20 μl/rxn) |
RNase free ddH2O | 1.25 ml×2 |
2×One Step Q Probe Mixa | 1.25 ml×2 |
One Step Q Probe Enzyme Mixb | 250 μl |
50×ROX Reference Dye 1c | 100 μl |
50×ROX Reference Dye 2c | 100 μl |
a. 包含dNTP Mix, Mg2+ ,缓冲液
b. 包含HiScript® II Reverse Transcriptase、RNase inhibitor以及Champagne TaqTM DNA Polymerase.
c. 用以校正孔与孔之间产品的荧光信号误差。使用ABI 7900HT/7300 Real-Time PCR System和StepOne PlusTM时使用50×ROX Reference Dye 1;ABI 7500,7500 Fast Real-Time PCR System, Stratagene Mx3000P使用50×ROX Reference Dye 2;Roche, Bio-Rad的Real-Time PCR仪不必使用ROX。
贮藏条件: -20℃。
质量控制
所有组分经检测均无核酸外切酶、核酸内切酶及RNase残留。
功能测试:以HeLa细胞总RNA为模板,1 pg-1 μg起始量的6个浓度梯度,扩增B2M基因。扩增效率在0.95-1.05之间,且模板量为1 pg时CT值在35以内。
注意事项
1. One Step Q Probe Enzyme Mix 含有高浓度的甘油,使用前请短暂离心,收集到反应管底部,并用移液枪轻轻吸打,充分混匀后准确吸取。
2. 反应液的配制请使用RNase-free 枪头,EP 管等,尽量避免污染。
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