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HiScript® II One Step qRT-PCR SYBR® Green Kit
染料法一步qRT-PCR，兼顾特异性和扩增效率
• 适合低成本、高通量的基因表达分析
• 特殊的添加剂成分，最大程度抑制引物二聚体的产生，定量结果更准确
• 兼顾高扩增效率，可检测低至1 pg的总RNA模板
图1. Q221具有更高灵敏度及更广的定量范围。
以Hela细胞总RNA为模板，用HiScript® II One Step qRT-PCR SYBR® Green Kit (Q221) 和其他公司试剂盒同时扩增B2M (A)和GUSB(B)基因。HiScript® II One Step qRT-PCR SYBR® Green Kit扩增效率更高，表现为同一模板量下较低的Ct值，且在低模板量下几乎没有引物二聚体产生。
HiScript® II One Step qRT-PCR SYBR® Green Kit采用SYBR® Green I 嵌合荧光法，专为以RNA为模板(如RNA病毒)的定量PCR检测而设计。使用基因特异引物 (GSP)，逆转录和PCR反应在一管内完成，不需要额外的开管/移液操作，大大提高了检测通量，并降低了污染的风险。整合HiScript® II Reverse Transcriptase以及Champagne TaqTM DNA Polymerase的优越性能，配合经过优化的缓冲体系，One Step qRT-PCR SYBR® Green Kit的检测灵敏度可达到1 pg 总RNA。Buffer中加入的增强因子可以有效减少引物二聚体的形成，提高特异性。试剂盒以便捷的Master Mix形式提供。
组分说明：
| 组分 | Q221-01 250 rnx (20 μl/rxn) |
| RNase free ddH2O | 1.25 ml×2 |
| 2×One Step SYBR® Green Mixa | 1.25 ml×2 |
| One Step SYBR® Green Enzyme Mixb | 250μl |
| 50×ROX Reference Dye 1c | 100μl |
| 50×ROX Reference Dye 2c | 100μl |
a. 包含缓冲体系、dNTP、特异性增强因子和SYBR® Green I荧光染料
b. 包含HiScript® II Reverse Transcriptase、RNase inhibitor以及Champagne TaqTM DNA Polymerase.
c. 用以校正孔与孔之间产品的荧光信号误差。使用ABI 7900HT/7300 Real-Time PCR System和StepOne PlusTM时使用50×ROX Reference Dye 1；ABI 7500,7500 Fast Real-Time PCR System, Stratagene Mx3000P使用50×ROX Reference Dye 2；Roche, Bio-Rad的Real-Time PCR仪不必使用ROX。
贮藏条件: -20℃。
质量控制
所有组分经检测均无核酸外切酶、核酸内切酶及RNase残留。
功能测试：以HeLa细胞总RNA为模板，1 pg-1 μg起始量的6个浓度梯度，扩增B2M基因。扩增效率在0.95-1.05之间，且模板量为1 pg时CT值在35以内。
注意事项
1. One Step SYBR® Green Enzyme Mix 含有高浓度的甘油，使用前请短暂离心，收集到反应管底部，并用移液枪轻轻吸打，充分混匀后准确吸取。
2. 使用2 ×One Step SYBR® Green Mix 时，请充分混匀后准确吸取，避免强光照射，并注意避光保存。
3. 反应液的配制请使用RNase-free 枪头、EP管等，尽量避免污染。
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