Bacteria RNA Extraction Kit
细菌总RNA提取试剂盒
· 针对原核生物(革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌)及真菌(非孢子)总RNA提取而定向优化
· 前处理液与基于异硫氰酸胍和酚的裂解液连用,大幅度提高RNA产量和纯度
· 操作简便,省时,无需溶菌酶或超声处理
图1.使用Bacteria RNA Extraction Kit提取大肠杆菌DH5α总RNA。
M:DL15000 DNA Marker。A:1x108菌量,100 ul Bacteria RNA Plus Reagent预处理。B:5x107菌量,100 ul Bacteria RNA Plus Reagent预处理。C:5x107菌量,100 ul DEPC水预处理。D:5x107菌量,不做预处理。以上洗脱体积均为25 ul,上样量1 ul。
Bacteria RNA Extraction Kit 是针对从细菌(革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌)中分离总RNA的简便,稳定的方法。试剂盒由Bacteria RNA Plus Reagent和RNA Isolater Total RNA Extraction Reagent组成。Bacteria RNA Plus Reagent含有优化的缓冲体系,螯合剂及蛋白变性剂等成分,能够高效抑制细菌内源RNA酶,同时使蛋白质变性。RNA Isolater总RNA提取试剂基于异硫氰酸胍和酚,具有极强的裂解能力,可在短时间内裂解样本,即时保护RNA的完整性。二者连用,可以从细菌中高效地提取总RNA,保证产量和质量的最大化。提取的总RNA适用于real-time PCR (qPCR), RT-PCR, northern blotting, nuclease protection assays, cDNA synthesis, microarray analysis, 以及dot blot hybridization等下游实验。本试剂也适用于酵母等真菌RNA提取。
组分说明
组分 | R403-01(100 rxn) |
Bacteria RNA Plus Reagent | 20 ml |
RNA Isolater Total RNA Extraction Reagent | 100 ml |
贮藏条件:
Bacteria RNA Plus Reagent 室温保存;
RNA Isolater Total RNA Extraction Reagent 4℃避光保存。
Q:RNA产量偏低。
A:(1)裂解不够完全或起始菌量低于要求起始量,可适当 增加起始菌量,或延长处理时间到5 min;
(2)RNA沉淀未完全溶解,可在60℃加热5 min充分溶解RNA。
Q:RNA降解。
A:使用Bacteria RNA Extraction Kit高温处理细菌数分钟不会引起RNA降解,加入RNA Isolater后可与游离出来的RNA充分接触,保护 RNA不受降解。分离出水相后的处理过程如果存在RNase则可能引起降解。因此务必在实验整体过程中使用RNase-free的枪头及离心管,使用DEPC处理过的水配制试剂及溶解RNA,保证操作区域的清洁,减少RNA降解的可能。某些原核细菌如枯草杆菌内源性RNase含量较高,难以完全灭活,如果发现产物有部分降解,可适量降低起始菌量,使用200 μl处理液,严格按照标准操作流程进行实验,全程保持低温操作。
温馨提示:因厂家更改产品包装、产地或者更换随机附件等没有任何提前通知,且每位咨询者购买情况、提问时间等不同,为此以下回复仅对提问者3天内有效,其他网友仅供参考!若由此给您带来不便请多多谅解,谢谢!
服务热线
0771-3293894