ChamQTM SYBR® Color qPCR Master Mix (Without ROX)
特异·灵敏·显而易见的qPCR预混液
减少移液错误:通过提供不同颜色的试剂,利用移液过程中的变色效应,追踪移液过程,减少移液错误。
扩增高度特异:使用新型抗体法热启动酶Champagne TaqTM DNA Polymerase,配以优化的Buffer和专利特异性促进因子 ExactorTM,有效避免引物二聚体和非特异性扩增的产生。
扩增性能卓越:在不失扩增特异性的同时,可以检测到个位数拷贝的基因表达,对目标基因定位准确、可信。
兼容程度完美:提供ROX预混版本,适用于所有主流定量PCR仪。
可实现移液过程追踪
ChamQTM SYBR® Color qPCR Master Mix 中包含蓝色染料, 而10×Dilution Buffer中包含黄色染料。当 ChamQTM SYBR® Color qPCR Master Mix(蓝色)中加入了用Dilution Buffer稀释的扩增模板(黄色)后会产生蓝色→绿色的变色效应,从而可以 根据体系颜色准确判断是否已加入模板。
染料不影响试剂的扩增性能
上图是用 ChamQTM Color(Vazyme # Q411)和 ChamQTM(Vazyme # Q311)同时扩增75个基因。其中有3 个基因Melt Curve出现杂峰,Q411和Q311 表现一致。72个基因特异性良好,将该72个基因的Ct作图比较,上图横坐标表示Q311 扩增72个基因的Ct 值,纵坐标表示 Q411扩增72个基因的Ct 值,根据方程 Y=0.9955X+0.3367可知,在Ct 值16-36的范围内,Q411和Q311扩增得到的Ct值高度一致。
特异性和灵敏度的完美平衡
图A是将pUC19质粒进行8 个10倍梯度稀释,图B是根据图A的Ct 值绘制的标准曲线。第8个梯度稀释中质粒拷贝数浓度约为5copies/4 μl,使用ChamQTM Color 预混液对各稀释梯度中的pUC19质粒进行检测,每孔模板使用量为4 μl。可以看到,ChamQTM Color 预混液在宽广的模板量区间具有优秀的线性关系,可以检测出具有个位数拷贝的待测模板,灵敏度极高。
稳健的重复性、精准的分辨力
以Hela细胞cDNA为模板,用ChamQTM Color预混液检测B2M基因的表达,设置48孔重复,用以检测扩增稳定性。可以看到,ChamQTM Color 预混液实验结果重复性极高。
以Hela细胞cDNA 原液以及10个两倍稀释梯度共计11个样品为模板,使用 ChamQTM Color预混液检测P450C17基因的表达, 每个模板设置 6 个复孔。可以看到,ChamQTM Color预混液可以在宽广的范围内,精确分辨2倍的模板浓度差异,且扩增高度特异。
近年来,Realtime-PCR技术因其快速、灵敏、准确、通量化等诸多优点,备受研究者青睐。然而,实验过程中组别繁多、加样易错、耗时费力等问题也给使用者造成了很大困扰。为了解决这个问题,Vazyme的科学家在 ChamQTM SYBR® qPCR Master Mix的基础上引入了示踪染料,并通过深度优化完全消除了示踪染料对预混液反应性能和稳定性的影响,进而成功推出了全新升级版本ChamQTM SYBR® Color qPCR Master Mix。该产品通过扩增模板加入后的变色反应,实现了加样过程的可视化,极大的提高了加样效率。其采用的Champagne TaqTM DNA Polymerase是一种新型的抗体法热启动DNA聚合酶,具有兼容性广、扩增性能强、灵敏度高等诸多优点,配以针对Realtime-PCR优化的最适Buffer以及专利特异性促进因子ExactorTM,完美的平衡了扩增特异性和扩增效率之间的矛盾。
组 分 | Q421-02 (500 rxn/20 μl/rxn) | Q421-03 (2,500 rxn/20 μl/rxn) |
2 × ChamQ SYBR Color qPCR Master Mix a | 1.25 ml × 4 | Q421-02 × 5 |
10 × Dilution Buffer b | 1.25 ml |
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