等温扩增首选用酶
Bst DNA Polymerase Large Fragment
● 具有很强的链置换活性,但缺失 5´→3´核酸外切酶活性
Bst DNA Polymerase Large Fragment是Bacillus stearothermophilus DNA聚合酶的一部分,具有5´→3´ DNA聚合酶活性,以及很强的链置换(strand displacement)活性,但缺失 5´→3´核酸外切酶活性。Bst DNA Polymerase Large Fragment可用于等温扩增反应,例如LAMP (Loop-mediated isothermal amplification), RCA (Rolling-circle amplification) 等。
贮存缓冲液
10 mM Tris-HCl pH 7.5, 50 mM KCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.1% Triton X-100, 50% glycerol
反应缓冲液 (10 × ThermoPol Buffer)
200 mM Tris-HCl pH 8.8, 100 mM KCl, 100 mM (NH4)2SO4, 20 mM MgSO4, 1% Triton X-100
来源
克隆有来自Bacillus stearothermophilus聚合酶基因 (缺失 5´→3´核酸外切酶活性)的重组E. coli菌株。
单位定义
65℃、30分钟内使1 nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量,定义为1个活性单位 (U)。
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