分子诊断首选热启动Taq酶
Champagne TaqTM DNA Polymerase
• 快速失活。95°C加热30秒即可完全失活,释放Taq DNA polymerase活性
• 具有极高的扩增灵敏度和特异性。非常适合于从复杂模板 (基因组,cDNA)中扩增低拷贝基因
• 对各种PCR/qPCR体系具有极佳的兼容性
高度的特异性和检测灵敏度
图1. 以1 ng-31.25 pg小鼠基因组为模板,用Champagne TaqTM DNA Polymerase和Taq DNA Polymerase扩增tPA基因300 bp片段。
混样后立刻开始PCR反应 (0 h),或者在55℃放置24小时后再开始PCR反应。
可以看到,Champagne TaqTM DNA Polymerase可以保证高度的特异性,而且检测灵敏度可以达到31.25 pg 基因组(相当于10拷贝)。
M,DL2000 Marker(货号MD101-01/02);1-6,1 ng-31.25 pg两倍稀释的小鼠基因组;7,NTC (无模板对照)。
低模板量扩增
图2. 以2 pg HeLa细胞总RNA为模板,用Champagne TaqTM DNA Polymerase和Taq DNA Polymerase做探针法one step RT-qPCR扩增CTNNB1基因,各设置8个重复。
可以看到,在低模板量下普通Taq酶几乎不能正常扩增,而Champagne TaqTM DNA Polymerase扩增信号正常,且检出率达到100% (8/8检出)。
Champagne TaqTM DNA Polymerase是由Champagne TaqTM antibody与Taq酶经过最佳比例混合得到的热启动Taq酶。基于Champagne TaqTM antibody的热稳定特性,Champagne TaqTM DNA Polymerase在55℃下仍可保持严谨的封闭性,使得在混样和体系升温阶段非特异扩增被抑制到最低程度。当反应升温至95℃ 30s以上时,Champagne TaqTM antibody彻底失活,Taq酶活性被完全释放,保证了PCR体系具有最高的扩增效率和灵敏度。 与化学修饰的热启动Taq酶相比,Champagne TaqTM DNA Polymerase的激活不受缓冲液pH、离子强度等因素的影响,因此具有更好的PCR体系兼容性,是基于PCR/qPCR的分子诊断试剂的首选用热启动Taq酶。
产品组分
组分 | P122-d1 500 U (2.5 U/µl) | P122-d2 500 U(5 U/µl) | P122-d3 500U (10 U/µl) |
10 × Champagne TaqTM Buffer (Mg2+ plus)
| 2 ml | 2 ml | 2 ml |
dNTP Mix (10 mM each) | 400 µl | 400 µl | 400 µl |
Champagne TaqTM DNA Polymerase(2.5 U/µl) | 200 µl | ------ | ------ |
Champagne TaqTM DNA Polymerase(5 U/µl) | ------ | 100 µl | ------ |
Champagne TaqTM DNA Polymerase(10 U/µl) | ------ | ------ | 50 µl |
贮藏与保质期:
-20 ℃保存。
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