用于末端平滑化

DNA Polymerase I Klenow Fragment

● 用随机引物制备探针

● 切除3′ 突出端或补平5′ 突出端，形成平末端

      DNA 聚合酶I，大片段 (Klenow 片段)是E.coli DNA聚合酶 I 的蛋白酶水解产物，具有5´→3´ DNA 聚合酶活性和3´→5´核酸外切酶活性，但缺失了5´→3´核酸外切酶活性。Klenow片段既保留了全酶的高保真性，又不会降解 DNA 5´末端。
 

贮存缓冲液
25 mM Tris-HCl pH 7.4,  0.1 mM EDTA,  1 mM DTT,  50% glycerol
 

反应缓冲液 (10 × Blue Buffer)
100 mM Tris-HCl pH 7.9,  500 mM NaCl,  100 mM MgCl₂,  10 mM DTT
 

来源
克隆有来自E.coli DNA Polymerase I Klenow Fragment基因的重组E. coli菌株。
 

单位定义
37℃、30分钟内使10 nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量，定义为1个活性单位 (U)。