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TruePrep DNA Library Prep Kit V2 for Illumina® 1ng-24rxn

价:
6200.00
价:
¥0.00

号:TD503-01

牌:Vazyme 诺唯赞

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EA (预计5-7工作日到货)

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基于转座酶的超快速DNA文库构建体系
TruePrepTM DNA Library Prep Kit V2 for Illumina®

 

单个样品建库时间少于90分钟

单管酶促反应,片段化和加接头反应同时进行,无需使用机械方法(超声、雾化等)进行片段化

文库扩增专用聚合酶,配以精心优化的反应缓冲,最大程度上保证了文库扩增的高效性和均一性

建库起始DNA量最低仅需1 ng

根据起始DNA量分类,提供共计3种不同规格试剂盒

提供96种双端index组合

 

图1. TruePrepTM超快速建库流程与传统建库流程耗时对比。 TruePrepTM建库系统将繁琐的DNA处理流程简化为一步10 min孵育,将单个文库构建时间缩短至90 min之内,使得单人单日可以达到96个文库的建库通量。

 


      TruePrepTM DNA Library Prep Kit V2 for Illumina®是针对Illumina高通量测序平台定向开发的专用试剂盒。使用该试剂盒可以将DNA制备成Illumina高通量测序平台专用测序文库。和传统文库构建方法相比,TruePrepTM试剂盒采用新型的转座酶法进行DNA片段化,将繁琐的DNA片段化、末端修复和接头连接反应等步骤变为一步简单的酶促反应,显著降低了起始DNA的需求量并缩短了文库构建时间。试剂盒共提供50 ng、 5 ng、 1 ng三种规格,可根据实验类型自由选择。试剂盒中提供的所有试剂都经过严格的质量控制和功能验证,最大程度上保证了文库构建的稳定性和重复性。

 

产品组分

货号

TD501-01/02

TD502-01/02

TD503-01/02

规格

24/96 rxn

24/96 rxn

24/96 rxn

起始DNA量

50 ng

5 ng

1 ng

TTE Mix V50

120/480 μl

TTE Mix V5

120/480 μl

TTE Mix V1

120/480 μl

5 × TTBL

240/960 μl

96/384 μl

96/384 μl

5 × TS

120/480 μl

120/480 μ

PPM

120/480 μl

TAE

24/96 μl

24/96 μl

24/96 μl

5 × TAB

240/960 μl

240/960 μl

240/960 μl

Control DNA

10/10 μl

10/10 μl

10/10 μl

*TTE = TruePrep Tagment Enzyme; TTBL = TruePrep Tagment Buffer L; TS= Terminate Solution;

 PPM = PCR Primer Mix; TAE = TruePrep Amplify Enzyme; TAB = TruePrep Amplify Buffer.

*Control DNA, Mouse Genomic DNA, 50 ng/μl.

3、贮藏与保质期

TD501,所有组分-20°C储存。有效期一年。

TD502,5 ×TS室温储存;其余组分-20°C储存。有效期一年。

TD503,5 ×TS室温储存;其余组分-20°C储存。有效期一年。

常见问题及解决方案

1. TruePrep Kit采用转座酶法对DNA进行片段化,与传统建库方法相比有什么区别?
传统的文库构建方法,先将DNA进行片段化,末端修复之后加上dA尾巴,然后进行加接头反应,TruePrep转座酶法将传统的这四个反应步骤简化为一个简单的酶促反应,仅需55℃ 10min即可直接进行测序之前的cluster制备。
2. TD501/502/503三个试剂盒的最大区别是什么?
三个试剂盒的最大区别在于建库的DNA起始量不同,分别为50ng,5ng和1ng.
3. 可否采用TD502或TD503构建50ng起始的DNA文库?
不推荐这么做,采用TD502或TD503构建50ng起始量的DNA文库,反应体系中酶的比例偏低,DNA的比例偏高,得到的insert size峰整体右移,反之整体左移,得到的文库与预期相差较远,对样本、试剂、测序质量和人力上均会造成一定的浪费。强烈建议根据实际DNA起始量,按照就近原则选择相应的TruePrep产品。
4. 使用TD501/502/503构建DNA文库时,55℃反应10 min后可否不用磁珠纯化或TS 溶液终止反应,而直接进行PCR文库扩增?
建议按照说明书流程进行纯化或终止反应。否则,片段化反应继续,可能最终得到的文库总长度与预期相比偏小,文库分叉等,质量较差。
5. TruePrepTM DNA Library Prep Kit V2 for Illumina®使用时应特别注意哪些?
(1)DNA的纯度:1.8≤OD260/280≤2.0
(2)DNA浓度测定:必须使用荧光染料法(如Qubit或PicoGreen法)进行浓度测定
(3)Kit内的各组分加入EP管进行反应之前,必须要用移液枪进行混匀,不能简单用手弹几下或采用涡旋的方法,否则会影响建库效果。

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