1. 对于石蜡切片:
①切片脱蜡至水。
②3%H2O2处理切片10分钟。
③自来水冲洗,蒸馏水洗。
④ 抗原修复:将切片浸泡在抗原修复液(1X)中,95-100℃加热约15分钟(加热时间可以控制在10-20分钟内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30分钟内冷却至室温。PBS洗3次,随后按选好的免疫组织化学染色方法进行染色。
随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
2. 对于冰冻切片:
用免疫染色洗涤液洗涤切片5分钟。将切片浸泡在抗原修复液(1X)中,95-100℃加热约15分钟(加热时间可以控制在10-20分钟内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。如果微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30分钟内冷却至室温。PBS洗3次,随后按选好的免疫组织化学染色方法进行染色。
3. 对于其它样品的抗原修复,可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。
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