1.用TBS-T将膜洗10分钟×3次,将膜充分浸泡于适当体积的再生液中,摇床震荡室温孵育30-60分钟(孵育时间视具体情况而定,表达量高的蛋白可适当延长时间,表达量低的蛋白可减少时间)。
2. 用镊子取出膜,用TBS-T洗涤缓冲液快速淋洗膜一次,然后洗膜5-10分钟。
3. 此时膜上结合的抗体己被洗脱,可重新封闭,进行下一轮抗体孵育。
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