Product Brief

Instructions

使用方法：

注：膜可以4℃保存在PBS或TBS中，直到可以进行剥离程序。

1.  将再生液用温水溶解或室温平衡至溶解。

2.  用TBS-T或PBS-T将膜洗10分钟×3次。

3.  将印迹膜放入再生液中，室温孵育20-30分钟。使用足够的体积以确保印迹膜完全润湿（对于8×10cm印迹需要约20mL）。

注意：优化孵化时间和温度对于获得最佳结果是必不可少的。对于一些抗体，室温孵育就足够了。然而，高亲和力抗体可能需要再温育5至10分钟。

4.用TBS-T或PBS-T将膜洗10分钟×3次。

5.按如下方法检测：

A.完整去除二抗的测试：将膜进行发光检测，如果5分钟内未检测到信号，则二抗已经成功地从抗原或一抗中去除。

B.完整去除一抗的测试：用HRP标记的二抗孵育膜，然后用洗涤缓冲液洗涤。孵育新的一抗和二抗，进行发光检测，如果5分钟内没有检测到信号，则已经成功地将一抗从抗原中除去。

6.如果在步骤5中检测到信号，则返回步骤2，再剥离5-15分钟。一些抗原/抗体系统需要更高的温度或更长的孵育时间来完全去除它们。优化剥离时间和温度以确保完全去除抗体，同时防止对抗原的损伤。

7.确定膜被适当剥离后，可以进行第二次免疫印迹实验。

注意：

1.印迹可以剥离和重复检测多次，但可能需要更长的曝光时间或更灵敏的化学发光底物。如果抗原在再生液中变得不稳定，随后的反应可能导致信号降低。

2.剥离后建议重新封闭印记膜。