1.1000g离心5分钟收集细菌,去上清液。将细菌悬浮于PBS,再次离心,弃PBS。
2.按湿菌体(g):裂解液(ml)=1:10-50的比例,将细菌团悬浮于相应体积的预冷裂解液进行裂解30-60分钟, 期间不断的混匀振荡。
3.如有超声器,可将细菌进行多次最高频率的短促冲击(每次10-30秒,重复4次,功率以不产生泡沫为准),在每次超声处理之间,将细菌再置于冰水内降温。
4.10000g,4℃离心10分钟。
5.仔细吸取上清,盛于另一离心管,置冰上备用。
6.必要时以10000g,4℃离心30分钟,去除凝聚的蛋白。然后仔细吸取上清,盛于另一离心管,置冰上备用。
7.上清液即为蛋白提取物,可以用于下一步的蛋白定量和蛋白的分析
温馨提示:因厂家更改产品包装、产地或者更换随机附件等没有任何提前通知,且每位咨询者购买情况、提问时间等不同,为此以下回复仅对提问者3天内有效,其他网友仅供参考!若由此给您带来不便请多多谅解,谢谢!
服务热线
0771-3293894