Product Brief

Instructions

需要材料：

蛋白酶和磷酸酶抑制剂

2ml离心管

组织研磨器

能达到10000g的离心机

注意事项：

1.抽提蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。

2.裂解得到的蛋白样品，含有较高浓度的去垢剂，不建议用Bradford 法测定蛋白浓度，可以选用BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。

3.抽提的可溶性蛋白处于非变性状态，可直接用于免疫沉淀反应和其他亲和纯化过程。

4.可透析，确保其与随后的分析系统兼容。

使用方法：

注意：取适当量的裂解液，放与4℃预冷，使用前数分钟内需加入酶抑制剂。

1. 手术切除的组织块迅速置于预冷的生理盐水中，漂洗数次，洗净组织血迹，用滤纸吸干组织表面液体，将组织切成几个较小的组织块。

2. 称量组织，按组织净重(g)：裂解液(ml)=1：10的比例，加入相应体积的预冷的裂解液进行匀浆 ，(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量)。

3. 匀浆器匀浆,肉眼观察无明显组织块，冰上孵育30分钟。

4. 10000g离心10分钟,取上清，即为蛋白提取物。

结果实例1：

依照本说明书操作，使用不同小鼠组织得到的蛋白量。

结果实例2：

如图：组织提取试剂提取不同小鼠组织的蛋白，BCA测定蛋白浓度，上样20ug，跑胶，转膜，孵育博士德一抗，使用博士德发光显色液显影。