*1 含有PrimeScript RTase、RNase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反应Buffer (含有Mg2+) 。
*2 制作标准曲线时梯度稀释cDNA或RNA标准品的稀释液。模板cDNA或RNA如果用水或TE Buffer稀释时，由于受Microtube吸附作用等的影响，往往不能准确地进行稀释，导致实验结果精度降低。使用本制品时，即使稀释至低浓度也能够进行准确地稀释，容易在宽广范围内获得准确定量的标准曲线。EASY Dilution (for Real Time PCR) 也可以单独购买 (Code No.: 9160/9160Q)。
注意：EASY Dilution请与本公司Real Time PCR试剂组合使用，对于其他公司的同类制品的适用性本公司尚未进行确认。
■ 制品说明
本制品是2 Step Real Time RT-PCR用的理想反转录反应试剂。5×PrimeScript RT Master Mix中含有定量RT-PCR的反转录反应所需的所有试剂 (PrimeScript RTase、RNase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反应Buffer)，加入模板RNA和水即可迅速进行反应。使用具有较强延伸能力的PrimeScript RTase，与制品PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time)(Code No.: RR037Q/A/B) 相同，可以在较短时间内高效合成Real Time PCR用模板cDNA。 本制品合成的cDNA可以用于SYBR® Green qPCR分析法和探针分析法，可以根据实验目的与SYBR Premix Ex Taq™ II (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR820Q/A/B) 、SYBR Fast qPCR Mix (Code No. RR430S/A/B) 和Probe qPCR Mix (Code No. RR391S/A/B) 等定量试剂配合使用，能够进行高性能的基因表达分析。
注意：Takara Bio使用SYBR Green I 作为研究试剂已得到Molecular Probes Inc.的许可。
■ 保存
-20℃。
■ 试剂盒特长
1. 制品为预先混好的Premix形式，只需加入模板RNA和水便可以开始反应。
2. 可以在较短时间内高效合成Real Time PCR用cDNA，是进行2 Step Real Time RT-PCR反应的理想试剂。
3. 使用了Random 6 mers和Oligo dT Primer 2种反转录引物，可以合成适合Real Time PCR用cDNA。
4. Real-time RT PCR定量需要建立标准曲线，建立标准曲线的条件就是需要将总RNA和反转录cDNA稀释到较低的浓度。如果用水或TE Buffer稀释时，由于模板浓度低不稳定，因而会缩小曲线范围，结果精度降低。本制品中附加了标准曲线制作用稀释液EASY Dilution (for Real Time PCR)，将Total RNA或cDNA稀释至低浓度时也能够进行准确稀释，容易在宽广范围内获得准确定量的标准曲线。
■ 注意事项
1. 5×PrimeScript RT Master Mix在使用前要小心地离心收集到反应管底部。由于5×PrimeScript RT Master Mix粘度高，用移液枪慢慢反复吸打充分混匀后使用。
2. 分装试剂时务必使用新的枪头 (Tip)，以防止样品间污染。
3. 本制品中已经加入了反转录Primer（Oligo dT Primer 和Random 6 mers），如果要使用Gene Specific Primer进行反转录反应，则不能使用本制品。
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