Caspase家族活性的检测
Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用。在正常状态下, Caspase家族都以无活性的酶原(30~50kD)形式表达,当细胞发生凋亡时Caspase可以被蛋白酶裂解,大亚基和小亚基形成活化的Caspase 。一些Caspase活化后可以次序激活其他Caspase形成Caspase级联反应,促发细胞凋亡。在目前已知的14种Caspase中,Caspase-3、8和9与凋亡的关系最为密切,在细胞凋亡中起执行凋亡的作用。将Caspase序列特异性的多肽偶联至发色基团,当该底物被特定的caspase剪切后,发色基团即游离出来,可通过酶标仪或分光光度计(λ=405nm 或400nm)测定其吸光值,考察caspase的活化程度。
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