胰蛋白酶(Trypsin) 是丝氨酸蛋白酶,可特异性地切开赖氨酸和精氨酸残基的羧基端。胰蛋白酶这种严格的特异性是蛋白质鉴定的基础。天然胰蛋白酶易于自我水解,产生假胰蛋白酶,后者特异性较广,含有胰凝乳蛋白酶样活性。存在于胰蛋白酶制剂中的这些自我水解产物能产生多余的肽片段,从而干扰质谱检测到的片段的数据分析。
Trypsin Gold, Mass Spectrometry Grade(胰蛋白酶,质谱分析级) 能提供最大限度的灵敏度。猪胰蛋白酶中的赖氨酸残基已经过还原甲基化修饰,成为活性高且稳定的分子,抗拒自我水解的性能特别强。纯化的胰蛋白酶的特异性又由于TPCK 处理使胰凝乳蛋白酶失活而进一步提高。处理过的胰蛋白酶又经过亲和层析纯化,制成冻干粉,成为Trypsin Gold, Mass Spectrometry Grade 。胰蛋白酶常用于胶内消化。消化产物经纯化和浓缩,然后再进行质谱分析确定分子量。然后用肽段的质量搜索数据库,鉴定分离在胶中的蛋白质。产品耐受轻度变性条件( 如0.1% SDS ,1M 尿素,或10%乙腈),并在2M盐酸胍中仍保留50%的活性。当酸性残基存在于易感键任一侧时,胰蛋白酶的活性会降低。如果脯氨酸存在于赖氨酸或精氨酸的羧基端,形成的肽键几乎完全抗胰蛋白酶切割。每批经过质检的Trypsin Gold, Mass Spectrometry Grade能够保障进行胶内消化和质谱分析。
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特点 - 优点• 质谱验证确保每批产品均合格:确保客户应用程序/ 仪器仪表的兼容性。 • TPCK 处理后进行亲和纯化:消除胰凝乳蛋白酶的活性,确保获得出色的一致性数据。 • 5 个冻融循环仍有活性:尽量减少所剩试剂。 • 上万篇的文献引用:性能可靠,用户广泛。 • 可定制或批量定购:详情请联系普洛麦格( 北京) 生物技术有限公司(www.promega.com/custom/) 应用
• 1-D或2-D凝胶中蛋白的胰蛋白酶消化
• 溶液中蛋白的胰蛋白酶消化 更多信息请见“实验操作和使用指南”的Protein Purification Analysis章节。 |
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